1.一种用于预防和/或治疗肥胖的低分子量岩藻多糖的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
a. 岩藻多糖提取:干燥的海带粉末用氯化钙水溶液在80‑120℃提取,提取液经浓缩、透析、醇沉、离心分离后,沉淀复溶、干燥,得钙提岩藻多糖;
b. 岩藻多糖纯化:取步骤a制备的钙提岩藻多糖用水溶解,加入乙二胺四乙酸二钠,调节pH至6.0,加入氯化钠,醇沉,离心;沉淀重复用水溶解、加入氯化钠、醇沉1‑2次,离心,沉淀复溶于水,调pH至6.0,过0.2 μm滤膜后干燥,得到纯化岩藻多糖;
c. 低分子量岩藻多糖制备:取步骤b制备的纯化岩藻多糖用去离子水a溶解,加入无水硫酸铜,调节pH至7‑8,再加入双氧水,在50‑70℃水浴降解4‑6h,反应结束后冷却至室温,加入NaOH除去铜离子,离心,上清调pH至中性后透析,截流液干燥后复溶至去离子水b中,经阴离子交换色谱纯化,分别以去离子水c、0.2 M、0.5 M、1.0 M氯化钠水溶液各重力洗脱2‑5个柱体积,收集0.5 M或1.0 M氯化钠水溶液的洗脱液,浓缩至原体积的50%后透析,截流液干燥,得到所述低分子量岩藻多糖,分子量为2.6 2.9 kDa;所述无水硫酸铜与纯化岩藻多糖~质量比为0.01‑0.1:1;所述双氧水体积浓度30%,加入终浓度为8‑10%;所述用于除去铜离子的NaOH加入终浓度0.3 M。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤a中氯化钙水溶液质量浓度0.1‑1.5%;所述氯化钙水溶液体积用量以海带粉末质量计为5‑15 mL/g。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤a按如下步骤进行:在干燥的海带粉末中加入质量浓度1%的氯化钙水溶液,100℃提取3 h,重复提取2次,抽滤,滤液合并冷却至室温后浓缩至原体积的20‑30%,3 kDa透析袋于纯水中透析72h,每12h更换一次水,截流液加入无水乙醇至乙醇体积终浓度75%,室温静置醇沉过夜,离心,沉淀用水复溶后‑40℃冷冻干燥
48h,得到钙提岩藻多糖。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤b中,每次溶解用水的量均以钙提岩藻多糖质量计为10‑30mL/g;所述乙二胺四乙酸二钠与钙提岩藻多糖质量比为0.01‑0.1:1;每次氯化钠用量与钙提岩藻多糖质量比为0.1‑1:1;每次醇沉所用无水乙醇体积用量均以钙提岩藻多糖质量计为10‑30mL/g。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤b按如下步骤进行:取步骤a制备的钙提岩藻多糖用水溶解,40 45℃水浴条件下搅拌溶解60 min,加入EDTA‑2Na,调节pH至6.0,加~入氯化钠a,用无水乙醇a室温静置醇沉,第一次离心;得到的第一次沉淀再次加水,剧烈搅拌60 min充分溶解,加入氯化钠b,用无水乙醇b室温静置醇沉,第二次离心;得到的第二次沉淀复溶于水,加入氯化钠c,用无水乙醇c室温静置醇沉,第三次离心;得到的第三次沉淀复溶于水,调pH至6.0,过0.2 μm滤膜后干燥,得到纯化的岩藻多糖。