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专利号: 2024107583828
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-25
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种用于mRNA递送的聚合物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:

1)以1,6‑己二醇二丙烯酸酯DAHE和亲水胺为原料,在80‑95℃下加热溶解反应,反应时间40‑60h,反应结束后经洗涤、干燥,得到两端为丙烯酸酯的前体聚合物;其中,亲水胺原料为A7、A8、A9、A13、A15中的一种:

2)使用疏水胺对步骤1)所得两端为丙烯酸酯的前体聚合物进行封端,所述前体聚合物与疏水胺在有机溶剂中搅拌反应,反应温度50‑65℃,反应时间是20‑55h,之后干燥,得到封端的终产物,记为聚合物PBAE;其中,疏水胺原料为2C4、2C6、2C8、2C10、C8’、C12’中的一种:

2.如权利要求1所述的一种用于mRNA递送的聚合物的制备方法,其特征在于步骤1)中,DAHE和亲水胺的摩尔比是0.8‑1.5:1,优选为1‑1.1:1;步骤1)反应温度85‑90℃,反应时间

45‑50h。

3.如权利要求1所述的一种用于mRNA递送的聚合物的制备方法,其特征在于步骤2)中,前体聚合物与疏水胺的摩尔比是1:3‑5,优选为1:4,反应温度是55‑60℃,反应时间是45‑

50h;

步骤2)中所述有机溶剂是四氢呋喃,疏水胺在有机溶剂中的浓度是0.01‑0.1mol/L,优选为0.03‑0.0625mol/L。

4.如权利要求1‑3任一所述方法制备的一种用于mRNA递送的聚合物,其特征在于,其分子量在1.5kDa~37kDa之间,聚合度在10~52之间。

5.一种脂质/聚合物杂化纳米粒的制备方法,其特征在于包括以下步骤:S1:将萤光素酶mRNA溶解在酸性溶液中,得到第一溶液;

S2:将权利要求4所述的聚合物与辅助脂质胆固醇、DOPE、PEG2000‑DMG、DOTAP分别溶解于无水乙醇,将上述五组分得到第二溶液;

S3:将第一溶液和第二溶液混合,获取混合溶液,进行摇床孵育;

S4:将孵育后的混合溶液以无菌PBS稀释,得到制备的含有脂质/聚合物杂化纳米粒的悬浮液。

6.如权利要求5所述的一种脂质/聚合物杂化纳米粒的制备方法,其特征在于步骤S1中,所述酸性溶液为柠檬酸钠溶液,10mM,pH=4.2。

7.如权利要求5所述的一种脂质/聚合物杂化纳米粒的制备方法,其特征在于步骤S2中,聚合物与胆固醇的摩尔比是1:0.8‑1.2,优选为1:0.9‑1.0;

聚合物与DOPE的摩尔比是1:0.2‑0.3,优选为1:0.25;

聚合物与DOTAP的摩尔比是1:0.2‑0.3,优选为1:0.25;

聚合物与PEG2000‑DMG的摩尔比是1:0.02‑0.05,优选为1:0.035‑0.04;

其中,步骤S2中聚合物溶解于无水乙醇的质量浓度为0.5‑2g/L,优选为1g/L;

步骤S2第二溶液中聚合物与DOTAP的总质量,是步骤S1第一溶液中萤光素酶mRNA质量的15‑25倍,优选为20倍。

8.如权利要求5所述的一种脂质/聚合物杂化纳米粒的制备方法,其特征在于步骤S3中摇床孵育时间为0.5~1.5h,步骤S4中以PBS对孵育后的混合溶液进行稀释,稀释倍数为4~

6倍,稀释后溶液中有机相乙醇的含量不高于10%。

9.如权利要求5‑8任一所述方法制备的一种脂质/聚合物杂化纳米粒。

10.如权利要求9所述的一种脂质/聚合物杂化纳米粒在制备mRNA疫苗药物中的应用。