1.间充质干细胞和HP‑16多肽在制备改善非酒精性脂肪肝患者肝功能的药盒中的用途,其特征在于:所述HP‑16多肽的氨基酸序列为:RTIGVYKSHLDPEECM;
所述间充质干细胞采用如下的方法分离培养制备得到:
S1、将新鲜脂肪组织在无菌条件下用PBS冲洗三次以去除血液和杂质,切割脂肪组织为
0.1*0.1cm³的小块;
S2、将组织小块放入含有5倍于组织体积的胶原酶类型I的容器中,在37℃下轻轻摇动以促进消化,时间40min,每隔10 min用细胞悬浮液吹打一次,直到组织完全分解;
S3、消化完毕后,加入等体积的DMEM高糖培养基以中止消化,所述DMEM高糖培养基含
10%胎牛血清,通过70目的滤网过滤,然后以1200r/min的速度离心5分钟,弃上清,用PBS重悬细胞并重复洗涤3次,以清除残留的酶和杂质;
S4、将细胞悬液在含有自制MSC培养基的培养皿中培养,此培养基组成为:1000mL的DMEM高糖、2.5μg/L的bFGF、200mL的血清替代物、10mL的非必需氨基酸和10mL的青霉素‑链霉素溶液100X,在37°C和5%CO2的条件下培养;
S5、当细胞长至80%汇合度时,用0.25%胰蛋白酶‑EDTA溶液消化细胞2min,加入等量含
10%胎牛血清的DMEM高糖培养基以中止消化,用吸管轻柔吹打,制备单细胞悬液,离心、洗涤后,将细胞以1:3的比例传代到新的培养皿中继续培养;
S6、在细胞达到P3代时,收获间充质干细胞。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述HP‑16多肽通过固相合成法制备。
3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述药盒中还含有药学上可接受的载体。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于:所述载体包括赋形剂。