1.一种秸秆产乳酸的工艺,其特征在于,包括以下步骤:a.将秸秆风干后进行粉碎过筛,然后进行冲洗烘干,得到秸秆末,使用三氯化铁和离子液体对秸秆末进行预处理,用水洗涤干燥后,得到预处理后的秸秆;
b.将预处理后的秸秆置于恒温摇床中,使用柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲溶液调节pH 至5.4,并且使秸秆含量在3%~6%,调节温度在50 ℃,以30 FPU/g的酶添加量加入固定化的酶,在
200 220 rpm 的速度下酶解18 20h;
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c.将固定化的发酵菌接种于糖化原料中,在200 220rpm速度下发酵48 72 h,以磁吸分~ ~离的方式取出固定化的发酵菌,然后将剩余发酵液进行分离,将上层液体进行提纯得到乳酸,回收下层固体中固定化的酶;
所述固定化的酶的制备方法包括以下步骤:
(1)将纤维素酶置于水中充分分散,得5 6mg/mL的酶分散液,按1:6 7的物质的量之比~ ~取硝酸钴和2‑甲基咪唑,分别置于甲醇中溶解,将酶分散液与2‑甲基咪唑溶液混合,得混合液;
(2)然后边搅拌边将混合液与硝酸钴溶液混合,以180 200rpm的速度搅拌0.5 1h后,静~ ~置12 24h,所得沉淀用水充分洗涤后,在‑20 26 ℃下预冷冻12h,再在30 mbar下冷冻干燥~ ~
24 30 h,得固定化的酶;
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所述固定化的发酵菌的制备方法包括以下步骤:S1、制备十六烷基三甲基溴化铵水溶液,边搅拌边依次于十六烷基三甲基溴化铵水溶液中按1:3 4的物质的量之比加入硝酸钴和2‑甲基咪唑,以180 200rpm的速度搅拌1 2h后,~ ~ ~将得到的沉淀充分洗涤并干燥,得紫色粉末;将紫色粉末置于氨气气氛下,在450 600℃下,~反应2 3h,自然冷却至室温,得黑色的基质;
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S2、将活化培养后的白腐菌菌种分离,得到菌体,将菌体与体积分数为2 3%的戊二醛溶~液混合,得到混悬液;将混悬液与基质混合,在30 35℃、120 140rpm 的条件下振荡16 20h~ ~ ~完成固定,分离沉淀并洗涤后,得固定化的发酵菌。
2.根据权利要求1所述的秸秆产乳酸的工艺,其特征在于,所述秸秆为禾本科农作物秸秆。
3.根据权利要求2所述的秸秆产乳酸的工艺,其特征在于,所述秸秆选自水稻秸秆、小麦秸秆、玉米秸秆中的一种。
4.根据权利要求1所述的秸秆产乳酸的工艺,其特征在于,步骤c所述固定化的发酵菌的接种量为5 10%。
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5.根据权利要求1所述的秸秆产乳酸的工艺,其特征在于,步骤(1)所述酶分散液与2‑甲基咪唑溶液体积比为1:1 1.2。
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6.根据权利要求1所述的秸秆产乳酸的工艺,其特征在于,使用稀盐酸调节所述酶分散液与2‑甲基咪唑溶液混合得到的混合液的pH=4.3 4.5。
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7.根据权利要求1所述的秸秆产乳酸的工艺,其特征在于,所述十六烷基三甲基溴化铵水溶液的浓度为0.1 0.2mmol/L;十六烷基三甲基溴化铵与硝酸钴的物质的量之比为1:200~
220;所述基质与菌体的质量比为1:1.2 1.5。
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8.根据权利要求1所述的秸秆产乳酸的工艺,其特征在于,在完成固定后,分离沉淀并洗涤后,将得到的沉淀在30 40℃下静置8 12h,得固定化的发酵菌。
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