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专利号: 2024101421815
申请人: 上海海事大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-05-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种提高海洋微生物代谢活性的方法,其特征在于,包括如下步骤:

1)基础培养基活化培养:将海洋假交替单胞菌接种至斜面培养基上在25‑35℃下活化培养;接着将斜面培养基菌种转接至液体培养基中进行摇瓶培养,培养温度为25‑35℃,转速120‑180rpm,培养时间24h‑48h,得活化培养液;摇瓶培养添加液体培养基总量0.3‑0.5%的甘氨酸;

2)发酵培养基刺激培养:将活化培养液按照4‑6%的接种量转接至2216E发酵培养基中,在25‑35℃、120‑180 rpm下刺激培养48‑72h得到发酵培养液;

所述刺激培养的过程中分批添加刺激剂,其中培养开始0‑12h,向发酵培养基中加入

0.5‑1.0%的壳聚糖适应性发酵;培养进行到24h‑36h时,向发酵培养基中继续添加刺激剂,所述刺激剂的组成和配比为:壳聚糖:酪蛋白的质量比为2:3,添加量为1.5%‑2.0%;

3)植物乳杆菌共育培养:将活化培养后的植物乳杆菌P8以5‑8%的添加量加入到步骤2)9

的发酵培养液中共育培养,其中植物乳杆菌活菌数大于1×10 CFU/ml,共育培养时间为

24h,温度30‑35℃,每隔6h搅拌20S,即得代谢活性提高的抗腐蚀细菌液;

所述海洋假交替单胞菌为解脂假交替单胞菌Pseudoalteromonas lipolytica,采购自上海保藏生物技术中心, 菌种编号:SHBCC D80739 SCSIO04301;

所述步骤1)中斜面培养基的组成为:蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸铁0.01g,琼脂

20.0g,人工海水1000ml,调pH至7.4~7.8;

所述步骤1)中液体培养基的组成为:蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸铁0.01g,人工海水

1000ml,调pH至7.4~7.8;

所述步骤3)中植物乳杆菌活化培养的方式为将植物乳杆菌P8菌粉经MRS培养基,在32℃~38℃下培养12~24h制备得到。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)中2216E发酵培养基的具体组成为蛋白胨5.0g,酵母粉1.0 g,柠檬酸铁0.1 g,氯化钠19.45 g,氯化镁5.98 g,硫酸钠

3.24 g,氯化钙1.8 g,氯化钾0.55 g,碳酸钠0.16 g,溴化钾0.08 g,氯化锶0.034 g,硼酸

0.022 g,硅酸钠0.004 g,氟化钠0.0024 g,硝酸铵0.0016 g,磷酸氢二钠0.008 g,蒸馏水

1000ml,调pH值至7.4~7.8。

3.一种采用权利要求1‑2任一所述方法制备得到的海洋抗腐蚀细菌液。

4.根据权利要求3所述的海洋抗腐蚀细菌液,其特征在于细菌液中胞外多糖的含量为

14‑17g/L。

5.一种权利要求3或4所述海洋抗腐蚀细菌液在抑制海洋环境中金属腐蚀中的应用。