利索能及
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专利号: 2024100190885
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.过表达生长素转运蛋白PtoPIN1a基因在提高毛白杨植株高度中的应用,其特征在于,编码所述生长素转运蛋白PtoPIN1a基因的氨基酸序列为SEQ ID No.2所示,编码所述生长素转运蛋白PtoPIN1a基因的核苷酸序列为SEQ ID No.1所示;具体包括如下步骤:(1)构建植物过表达载体:扩增毛白杨生长素转运蛋白PtoPIN1a基因,将其与植物表达载体相连接,然后转化农杆菌;

(2)毛白杨的遗传转化:采用农杆菌介导的叶盘法转化野生型毛白杨叶片;

(3)转基因植株分子检测:以转基因植株的基因组DNA为模板,通过扩增骨架载体和目的基因片段之间的一段基因进行筛选,筛选出高生物量的白杨;

步骤(1)中,所述扩增生长素转运蛋白PtoPIN1a基因的方法为:以杨树cDNA为模板,SEQ ID NO .3和SEQ ID NO  .4所示序列为引物进行PCR扩增,电泳检测,回收,获得生长素转运蛋白PtoPIN1a基因;

步骤(1)中,所述植物过表达载体为将SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列通过同源重组方式连入经过人工改造的pCAMBIA1300‑LMX5载体的Asc1酶切位点处而得,所述pCAMBIA1300‑LMX5载体构建方法为用EocR I和Kpn I将pCAMBIA1300载体中的CaMV35S组成型启动子切掉,将SEQ ID NO.5所示的LMX5启动子连入pCAMBIA1300载体的EocR I和Kpn I酶切位点处,获得木质部特异性启动子LMX5驱动的特异性植物表达载体;

步骤(3)中,扩增引物序列为SEQ ID NO .6和SEQ ID NO .7所示。