1.一种NK细胞冻存保护剂,其特征在于,由以下成分组成:培养基、藻朊酸钠、葛仙米多糖、玉米醇溶蛋白、磷酸二氢钾、腺嘌呤;
各组分在培养基中的含量为:藻朊酸钠10‑20μg/mL、葛仙米多糖2.5‑6.5μg/mL、玉米醇溶蛋白4.5‑10μg/mL、磷酸二氢钾5‑10nmol/mL、腺嘌呤25‑40ng/mL。
2.根据权利要求1所述NK细胞冻存保护剂,其特征在于,所述葛仙米多糖的制备方法如下:(1)取新鲜葛仙米干燥至水分含量10‑15%,粉碎后得到葛仙米粉;
(2)将步骤(1)的葛仙米粉加入蒸馏水中浸泡5‑10h,然后加热回流提取3‑4h,收集提取液;
(3)将步骤(2)的提取液减压浓缩,收集浓缩液;
(4)向步骤(3)的浓缩液中加入食用乙醇,使混合液中乙醇含量达到50‑60%,在6℃静置5‑10h,离心收集沉淀,冷冻干燥得到葛仙米多糖。
3.根据权利要求2所述NK细胞冻存保护剂,其特征在于,步骤(2)中葛仙米粉和蒸馏水的料液比为1:200‑300。
4.根据权利要求2所述NK细胞冻存保护剂,其特征在于,步骤(3)中浓缩液的体积为提取液体积的20‑30%。
5.根据权利要求1所述NK细胞冻存保护剂,其特征在于,所述培养基为RPMI‑1640培养基。
6.一种NK细胞的冻存方法,其特征在于,采用权利要求1至5任一项所述的冻存保护剂冻存NK细胞。
7.根据权利要求6所述NK细胞的冻存方法,其特征在于,包括将NK细胞用冻存保护剂重悬,分装至冻存管中,程序降温至‑80℃,在‑80℃保存2‑4h后转移至液氮中。
8.根据权利要求7所述NK细胞的冻存方法,其特征在于,所述NK细胞在冻存保护剂中的6
密度为:1‑6×10个/mL。
9.根据权利要求7所述NK细胞的冻存方法,其特征在于,所述程序降温过程为:首先以
1‑2℃/min降温至6℃,然后以20‑25℃/min降温至‑30℃,最后以5‑10℃/min降温至‑80℃。