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专利号: 2023108799149
申请人: 江苏科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-01-15
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种多肽,其特征在于,所述多肽的氨基酸序列为Gly‑Pro‑Ala‑Gly‑Asp‑Pro‑Ala或Pro‑Pro‑Val‑Glu‑Glu‑Pro。

2.一种权利要求1所述的多肽的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将波罗的海鲱鱼研磨为鱼糜后和水混合,搅拌,加热至50~65℃形成粗蛋白液;

(2)向粗蛋白液中加入碱性蛋白酶和含金属离子的化合物进行一次酶解,再加入风味蛋白酶进行二次酶解,得到酶解液;

(3)将酶解液灭酶后低温离心去除沉淀,将上清液浓缩后冷冻干燥;

(4)对浓缩后的上清液进行过滤,分别收集<3kDa、3‑10kDa、>10kDa的提取物,用反相液相色谱纯化;

(5)将步骤(4)获得的序列信息与大西洋鲱鱼序列进行比对、筛选和DPP‑Ⅳ抑制活性预测,并根据DPP‑Ⅳ抑制肽的结构特征确定多肽的序列;

(6)检测步骤(5)中筛选得到的DPP‑Ⅳ抑制活性预测值高的多肽DPP‑Ⅳ体外抑制活性,并利用高血糖动物模型检测其降血糖活性,筛选得到真正具有体内降血糖活性的多肽化合物。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述的一次酶解粗蛋白液添加质量浓度为1%~4%,pH为7.0~8.0,碱性蛋白酶添加质量浓度为1%~4%,金属离子浓度0.1~2.0mmol/L,酶解温度为50~65℃,酶解时间为2~4小时;所述金属离子包括锌离子、镁离子或钙离子中的一种或多种;步骤(2)中所述的二次酶解风味蛋白酶添加质量浓度

1%~3%,酶解温度为50~65℃,酶解时间为1~2小时。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述的含金属离子的化合物为0.1~1.2mmol/L ZnSO4、0.1~1.2mmol/L MnSO4和0.1~2.0mmol/L CaCl2中的一种或多种。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中的灭酶温度为80~95℃,时间为10~30分钟;离心温度为4℃,条件为10000g离心15~25分钟。

6.一种权利要求1所述的多肽在如下a~c至少一种中的应用:(a)制备改善胰岛素抵抗的产品;

(b)制备降低血糖和糖化血红蛋白水平的产品;

(c)制备降低胰岛素水平的产品。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述产品包括药品。

8.一种权利要求1所述的多肽在制备预防或治疗二型糖尿病药物中的应用。

9.根据权利要求6~7或8任一项所述的应用,其特征在于,所述应用中多肽的浓度为

0.6mg/mL以上。