利索能及
我要发布
收藏
专利号: 202310491234X
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-19
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种颜色可调与窄发光的片状纳米晶的可控组装纳米晶探针,其特征在于以巯基化修饰的树枝状介孔二氧化硅dSiO2‑SH微球为模板,在模板dSiO2‑SH上亲和组装红色、绿色或黄色型片状纳米晶构建油溶性组装体dSiO2‑NPLs;

在模板dSiO2‑SH上亲和组装所述红色、绿色或黄色型片状纳米晶构建油溶性组装体dSiO2‑NPLs的过程为:将模板dSiO2‑SH加入至含红色、绿色或黄色型片状纳米晶NPLs的甲苯溶液中,超声5‑10分钟处理后获得均匀分散的溶液,通过离心除去上清液,用甲苯洗涤后,即获得油溶性组装体dSiO2‑NPLs;其中,所述甲苯溶液中红色、绿色或黄色型片状纳米晶NPLs的浓度为8‑12 mg/mL,红色、绿色或黄色型片状纳米晶NPLs与模板dSiO2‑SH的投料比为1.8‑2.2:1;

以所述油溶性组装体dSiO2‑NPLs为原料,经转水相后偶联抗体制备可控组装纳米晶探针,具体过程如下:对所述油溶性组装体dSiO2‑NPLs,以正辛基三甲氧基硅烷/甲醇/氨水为水解体系经硅烷化修饰,组装体转水相后,通过Stöber法利用正硅酸乙酯TEOS在其表面水解生长二氧化硅薄层,以便将孔道内的纳米晶与外界复杂环境隔绝;接着,依次通过3‑氨丙基三乙氧基硅烷进行氨基修饰、以及通过丁二酸酐进行羧基修饰,将羧基修饰的组装体与抗体进行偶联以及封闭,最终获得基于颜色可调与窄发光的片状纳米晶的可控组装纳米晶探针;

所述红色、绿色或黄色型片状纳米晶,均为核‑缓冲层‑壳型片状纳米结构,红色型片状纳米晶是以CdSe为核心,绿色和黄色型片状纳米晶均是以S元素掺杂的CdSeS为核心,三者均是以CdS作为缓冲层且以ZnS作为壳层,使最终纳米晶的发射波长在540‑640 nm范围内且发射峰半峰宽均在20 nm‑30 nm之间;

所述纳米晶的制备方法包括以下步骤:

1)纳米晶核心采用CdSe或者以S元素掺杂的CdSeS,CdSeS中摩尔比S:Cd≤0.37;

2)以十八烯ODE为溶剂,醋酸镉、油胺、油酸锌、辛硫醇和纳米晶核心CdSe或CdSeS在溶剂中混合反应,于280‑320 ℃温度下反应15‑40 min,降温至室温之后,加入正己烷和乙醇沉淀产品,用乙酸乙酯洗涤纯化后,即制备完成;

所述醋酸镉和油酸锌均是提前于80‑100 ℃加热熔融形成液体,以便用于反应;

制备红色型片状纳米晶时,醋酸镉液体、辛硫醇液体、油胺、油酸锌的体积比为1 : 

0.05‑0.06 : 0.08‑0.12 : 0.3‑0.35,以CdSe为核心;

制备绿色型片状纳米晶时,醋酸镉液体、辛硫醇液体、油胺、油酸锌的体积比为1 : 

0.15‑0.16 : 0.8‑1.0 : 2.5‑3.0,以S元素掺杂的CdSeS为核心;

制备黄色型片状纳米晶时,醋酸镉液体、辛硫醇液体、油胺、油酸锌的体积比为1 : 

0.065‑0.07 : 0.2‑0.22 : 0.6‑0.7,以S元素掺杂的CdSeS为核心。

2.如权利要求1所述的一种颜色可调与窄发光的片状纳米晶的可控组装纳米晶探针,其特征在于通过3‑氨丙基三乙氧基硅烷进行氨基修饰的过程为:将组装体分散在乙醇中,加入氨水和 3‑氨丙基三乙氧基硅烷,在室温下搅拌反应10‑15 h,之后离心,用乙醇清洗,即获得表面带有氨基基团的组装体。

3.如权利要求1所述的一种颜色可调与窄发光的片状纳米晶的可控组装纳米晶探针,其特征在于通过丁二酸酐进行修饰的过程为:将带有氨基基团的组装体分散在含有丁二酸酐的N,N‑二甲基甲酰胺溶液中,搅拌反应3‑5 h,之后离心,用乙醇和水清洗,即获得羧基修饰的组装体。

4.如权利要求1所述的一种颜色可调与窄发光的片状纳米晶的可控组装纳米晶探针,其特征在于将羧基修饰的组装体与抗体进行偶联以及封闭的过程为:将羧基修饰的组装体加入pH=6.0 PB缓冲液中,加入NHS和EDC,于摇床中室温孵育20 40 min;随后离心收集产~物;将产物重悬于pH=7.4 PB缓冲液中,加入标记抗体,室温摇床反应2 3 h;反应结束后,离~

心,分散在pH=7.4 PB缓冲液中,加入终浓度1.5‑2.5 mg/ml乙醇胺猝灭偶联反应,然后加入

10 % w/v的反式脂肪酸BSA封闭2 h;随后离心收集微球,用pH=7.4 PB缓冲液洗涤后,保存在蛋白缓冲液中冷藏保存。

5.一种用于荧光免疫层析平台检测新冠N蛋白抗原的免疫层析试纸,其特征在于包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸和聚苯乙烯底板,硝酸纤维素膜搭接在聚苯乙烯底板上,样品垫、结合垫依次叠压在硝酸纤维素膜的左端,吸水纸叠压在硝酸纤维素膜的右端;所述硝酸纤维素膜上设置靠近结合垫的检测线T线、靠近吸水纸的一条控制线C线;

所述结合垫上包被权利要求1所述的可控组装纳米晶探针,其中,结合垫上包被的可控组装纳米晶探针中组装红色片状纳米晶;所述硝酸纤维素膜的T 线上包被新冠N蛋白单克隆抗体以及权利要求1所述的可控组装纳米晶探针,其中,T线上包被的可控组装纳米晶探针中组装绿色片状纳米晶;所述硝酸纤维素膜的C线上包被羊抗鼠抗体IgG。

6.如权利要求5所述的一种用于荧光免疫层析平台检测新冠N蛋白抗原的免疫层析试纸,其特征在于:所述免疫层析试纸的应用方法为:将含有不同抗原浓度的新冠N蛋白的样品液滴加至免疫层析试纸条的样品垫上,在吸收垫的毛细作用力下,抗原流经结合垫并与探针结合,在硝酸纤维素膜上完成反应;3‑10 min后用手机对硝酸纤维素膜的T 线拍照,定量读取信号进行分析。