1.一种鸡头黄精无性系建立及微根茎快速繁殖方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)外植体的预处理及消毒;
(2)初代培养:将鸡头黄精根茎切成小段,接种于初代培养基中培养,所述初代培养基为MS+0.2mg/L6‑BA+(0.2~0.5)mg/LNAA或MS+0.2mg/L6‑BA+(0.5~1.0)mg/LIBA;
(3)愈伤组织及不定根诱导培养:将初代培养获得的材料切成小段,接种于诱导培养基中培养至不定根生成,所述诱导培养基为MS+(0.5~1.0)mg/L6‑BA+(0.5~1.0)mg/LNAA;
(4)微根茎诱导:将不定根剪去根尖转入微根茎诱导培养基中,不定根切口愈伤化产生新的不定根或者膨大后形成微根茎;所述微根茎诱导培养基为MS+0.5mg/L6‑BA+(0.5~
1.0)mg/LNAA+(0.5~2.0)mg/LIBA;
(5)微根茎增殖:将上步骤诱导产生的微根茎转入微根茎增殖培养基上培养获得增殖的微根茎或丛生苗;所述微根茎增殖培养基为MS+(1.0~2.0)mg/L6‑BA+0.5mg/LNAA+(0.5~1.0)mg/LIBA;
且,步骤(2)~(5)均为21±1℃遮光培养,湿度70%~80%。
2.根据权利要求1所述的鸡头黄精无性系建立及微根茎快速繁殖方法,其特征在于,步骤(1)外植体的预处理及消毒方法为以根状茎为外植体,用75%酒精消毒6~8s,无菌水漂洗3次,再用0.1%HgCl2处理8min,无菌水漂洗5次。
3.根据权利要求1所述的鸡头黄精无性系建立及微根茎快速繁殖方法,其特征在于,步骤(2)初代培养将根茎切成0.5~1.0cm小段,所述初代培养基为MS+0.2mg/L6‑BA+(0.2~
0.5)mg/LNAA。
4.根据权利要求1所述的鸡头黄精无性系建立及微根茎快速繁殖方法,其特征在于,步骤(3)愈伤组织及不定根诱导培养将材料切成0.5~1.0cm小段,所述诱导培养基为MS+
1.0mg/L6‑BA+1.0mg/LNAA。
5.根据权利要求1所述的鸡头黄精无性系建立及微根茎快速繁殖方法,其特征在于,步骤(4)微根茎诱导中剪去根尖的不定根为幼嫩不定根,剪去长度为0.3cm~0.5cm;
所述微根茎诱导培养基为MS+0.5mg/L6‑BA+1.0mg/LNAA+0.5mg/LIBA。
6.根据权利要求1所述的鸡头黄精无性系建立及微根茎快速繁殖方法,其特征在于,步骤(5)微根茎增殖培养基为MS+2.0mg/L6‑BA+0.5mg/LNAA+0.5mg/LIBA。
7.根据权利要求1所述的鸡头黄精无性系建立及微根茎快速繁殖方法,其特征在于,步骤(2)~(5)中MS培养基均含7.6g/L琼脂和30g/L蔗糖,pH值为5.8。
8.根据权利要求1~7所述的鸡头黄精无性系建立及微根茎快速繁殖方法,其特征在于,还包括移栽定植步骤,具体操作为用水洗净微根茎或丛生苗上的培养基,再用2‰甲基托布津冲洗1min,然后移栽苗床,覆土深度2~4cm,浇水定植,最后外搭塑料拱棚,并加黑色遮阳网,控制光照;保持空气湿度70%~80%,温度23~25℃;
待新芽抽出后,移栽大田定植。