1.一种猫冠状病毒S蛋白mRNA的体外转录系统，其特征在于，包括核酸分子，该核酸分子的碱基序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种如权利要求1所述猫冠状病毒S蛋白mRNA的体外转录系统的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：（a）以猫冠状病毒S蛋白片段作为目的基因，从5’和3’非编码区元件入手，根据不同来源、不同排布的非编码区元件，构建三种体外转录核酸分子，分别为IVT‑Sn1‑mRNA、IVT‑Sn2‑mRNA及IVT‑Sn3‑mRNA，IVT‑mRNA碱基序列如SEQ ID NO:1所示；IVT‑Sn2‑mRNA碱基序列如SEQ ID NO:2所示，IVT‑Sn3‑mRNA碱基序列如SEQ ID NO:3所示；它们的区别在于非编码区序列的不同；

（b）将所述体外转录核酸分子通过两端酶切位点连接到体外转录载体，构建pGEM‑S，分别得到pGEM‑Sn1，pGEM‑Sn2及pGEM‑Sn3；转入大肠杆菌大量培养，并对重组质粒进行线性化单酶切处理及胶回收，获得体外转录的DNA模板；

（c）用T7酶体外转录获得构建好的FCoV S mRNA，并进行加帽反应及纯化；鉴于EGFP易于观察检测的特点，用同样的技术路线构建了pGEM‑EGFP载体，分别得到pGEM‑EGFPn1，pGEM‑EGFPn2及pGEM‑EGFPn3，并体外转录成EGFP mRNA；

（d）以EGFP mRNA作为报告基因进行细胞转染实验，并在体外转染多种细胞系以验证IVT‑mRNA系统；

（e）制备脂质体纳米颗粒LNPs：用制备的阳离子脂质纳米材料LNPs与 FCoV S mRNA进行自组装，制备 FCoV S mRNA‑LNPs；

（f）以制备的FCoV S mRNA‑LNPs转染细胞进行体外细胞转染实验，测定细胞S蛋白的表达。

3.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述步骤（a）中，所述体外转录载体为pGEM‑3Zf(+)。

4.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述步骤（b）中，所述大肠杆菌为TOP10；

线性化单酶切的位点为XhoⅠ。

5.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述步骤（c）中，所述体外转录反应：体外转录反应体系为：反应体系20μL，其中Linearized template DNA with T7 RNAP promoter 1μg、10X T7‑FlashScribe Transcription Buffer 2μL、100 mM ATP 1.8μL、100 mM CTP 1.8μL、100 mM UTP 1.8μL、100 mM GTP 1.8μL、100 mM DTT 2μL、ScriptGuard RNase Inhibitor 0.5μL、T7‑FlashScribe Enzyme Solution 2μL，补充灭菌ddH2 O至终体积20μL；体外转录反应条件为：37℃反应2h；加入RNase‑Free DNase I 1μL，37℃反应

15min。

6.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述步骤（c）中，所述加帽反应：加帽反应体系为：反应体系100μL，其中In vitro transcribed RNA 50‑60 µg，补充灭菌ddH2 O至

67μL、10X ScriptCap Capping Buffer 10μL、10 mM GTP 10μL、20 mM SAM 2.5μL、ScriptGuard RNase Inhibitor 2.5μL、ScriptCap 2'‑O‑Methyltransferase 4μL、ScriptCap Capping Enzyme 4μL；加帽反应条件为：In vitro transcribed RNA 65℃

10min后置于冰上保存；混合10X ScriptCap Capping Buffer、10 mM GTP、20 mM SAM、ScriptGuard RNase Inhibitor、ScriptCap 2'‑O‑Methyltransferase，最后加入ScriptCap Capping Enzyme；混合两种溶液37℃反应30min。

7.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述步骤（d）中，所述转染包含以下步骤：

（d1）将细胞接种于12孔板，用培养基进行培养，直至细胞融合度近80%；

（d2）将残留的培养基清洗干净；每孔加入不含血清与抗生素的培养基；

（d3）按一定的体积与质量比分别配置Lipofectamine3000 Reagent和EGFP mRNA溶液，之后等比例进行混合，室温静置15min后，逐滴加入孔中，将孔板中液体轻轻摇晃均匀后，放入温箱中继续培养；

（d4）培养时间超过12h，需要在第6h每孔补加含胎牛血清不含抗生素的培养基。

8.如权利要求7所述的构建方法，其特征在于，所述步骤（d1）中，所述转染细胞为CRFK猫肾细胞；培养基为DMEM培养基；培养基中胎牛血清比例为10%。

9.如权利要求7所述的构建方法，其特征在于，所述步骤（d3）中，所述体积与质量比为

1.5μL/0.75μg。