1.一种鸭坦布苏病毒多克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:S100、将鸭坦布苏病毒的Capsid基因与空载体连接后,构建形成重组质粒;
S200、将步骤S100中得到的重组质粒转化至感受态细胞后,经培养纯化,得到纯化后的重组Capsid蛋白;
S300、以步骤S200中得到的重组Capsid蛋白作为抗原进行免疫,获得鸭坦布苏病毒多克隆抗体;其中,所述鸭坦布苏病毒的保藏号为CCTCC No:V202262,于2022年9月15日保藏于中国典型培养物保藏中心。
2.根据权利要求1所述的一种鸭坦布苏病毒多克隆抗体的制备方法,其特征在于,步骤S100具体包括:S101、将DEF细胞接种鸭坦布苏病毒进行培养,收获细胞,提取RNA后反转录,获得cDNA;
S102、以步骤S101中获得的cDNA作为模板,通过PCR扩增得到鸭坦布苏病毒的Capsid基因;
S103、将步骤S102中得到的Capsid基因与空载体连接,得到连接产物;
S104、将步骤S103中得到的连接产物转化DH5α感受态细胞后进行培养后,酶切测序,构建形成重组质粒,记为pET‑30a‑Capsid。
3.根据权利要求2所述的一种鸭坦布苏病毒多克隆抗体的制备方法,其特征在于,步骤S102中的扩增引物如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示。
4.根据权利要求2或3所述的一种鸭坦布苏病毒多克隆抗体的制备方法,其特征在于,步骤S102中,扩增过程的反应条件为:94℃,2min;98℃,10s,68℃,1min,30个循环;68℃,
5min。
5.根据权利要求1或2所述的一种鸭坦布苏病毒多克隆抗体的制备方法,其特征在于,步骤S200具体包括:S201、将空载体和pET‑30a‑Capsid同时转化至BL21(DE3)感受态细胞培养,挑取培养后的单菌落接种于卡那抗性LB培养基中形成为菌液,进行培养;
S202、检测步骤S201中菌液的OD600值,至OD600值为0.6‑0.9时,加入IPTG诱导培养后,离心收集菌体进行洗涤后重悬,超声破碎至溶液澄清,分离上清液与沉淀,收集沉淀进行纯化,得到纯化后的重组Capsid蛋白。
6.根据权利要求1或2所述的一种鸭坦布苏病毒多克隆抗体的制备方法,其特征在于,步骤S300具体包括:S301、以纯化后的重组Capsid蛋白和ISA206佐剂混合物作为抗原,对小鼠进行第一次免疫;
S302、对经过第一次免疫后的小鼠进行第二次免疫后,收集小鼠血清,对应获得鸭坦布苏病毒多克隆抗体。
7.根据权利要求1‑3中任意一项所述的一种鸭坦布苏病毒多克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述鸭坦布苏病毒的Capsid基因的序列如SEQ IDNo:3所示。
8.根据权利要求1‑3中任意一项所述的一种鸭坦布苏病毒多克隆抗体的制备方法,其特征在于,步骤S300中,重组Capsid蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No:4所示。
9.一种根据权利要求1‑8中任意一项所述的制备方法制得的鸭坦布苏病毒多克隆抗体。