1.一种基于UPLC‑Q‑TOF‑MS标记脂质的痕量鉴定大熊猫乳的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)采集牛乳、羊乳和大熊猫乳样品,分别提取乳中脂质;
(2)利用超高效液相色谱‑飞行时间质谱联用技术对步骤(1)提取的脂质分别进行色谱分离和质谱检测;
(3)采用MSDIAL 4.0软件对照Lipidblast Version 68的脂质片段数据库对步骤(2)获得的脂质质谱数据进行定性和定量分析;
(4)以步骤(3)中定性后的脂质在大熊猫乳与羊乳、大熊猫乳与牛乳中的相对定量值之比的对数值作为判断脂质丰度水平变化的依据,该对数值大于1.5则为上调脂质,该对数值小于2/3则为下调脂质,该对数值处于1.5和2/3之间则该脂质丰度在牛乳、羊乳与大熊猫乳样品中无显著变化;
(5)利用维恩图,对大熊猫乳与羊乳、大熊猫乳与牛乳中共有的上调脂质以及下调脂质做进一步分析,并对大熊猫乳与羊乳、大熊猫乳与牛乳共有的上调差异脂质和下调差异脂质按对数值从大到小排序,分别取共有上调差异脂质中前5%和共有下调差异脂质中后5%作为大熊猫乳的标记脂质;
(6)按照上述步骤(1)至(4)的方法检测待测乳样品中标记脂质,如果标记脂质含有步骤(5)所述大熊猫乳的标记脂质,则判断该待测乳样品为大熊猫乳。
2.根据权利要求1所述的基于UPLC‑Q‑TOF‑MS标记脂质的痕量鉴定大熊猫乳的方法,其特征在于:步骤(1)中,分别用120μL预冷的脂质提取缓冲液提取20μL收集的牛乳、羊乳和大熊猫乳样品,涡旋并摇晃90~150秒后在室温下孵化10~15分钟,分别得到提取混合物;将提取混合物在‑20℃下储存过夜后,在4000g下离心20分钟,取上清液于‑80℃冰箱保存;其中所述脂质提取缓冲液是异丙醇与乙腈、水体积比2:1:1的混合液。
3.根据权利要求1所述的基于UPLC‑Q‑TOF‑MS标记脂质的痕量鉴定大熊猫乳的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述色谱分离的条件为:Kinetex UPLC C18柱,流动相A:乙腈与水体积比4:6~7:3的混合液中再添加该混合液体积0.05%~0.15%的甲酸;流动相B:异丙醇与乙腈体积比8:2~9:1的混合液中再添加该混合液体积0.05%~0.3%的甲酸溶液;洗脱程序:0~0.4分钟,30%B;0.4~1分钟,30%~45%B;1~3分钟,45%~60%B;3.5~5分钟,
60%~75%B;5~7分钟,75%~90%B;7~8.5分钟,90%~100%B;8.5~8.6分钟,100%B;
8.6~8.61分钟,100%~30%B;8.61~10分钟,30%B;流速:0.1~0.4mL/min;柱温:45~65℃;上样量:1~2μL。
4.根据权利要求1所述的基于UPLC‑Q‑TOF‑MS标记脂质的痕量鉴定大熊猫乳的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述质谱检测的条件为:正离子和负离子模式下运行,幕布气体:25~35PSI;离子源气体1:55~65PSI;离子源气体2:55~65PSI;界面加热器温度:500~700℃;离子喷雾电压浮动值:4000~6000V正离子模式,‑4000~‑5500V负离子模式;质谱数据在IDA模式下收集;TOF质量范围:30~1500;调查扫描:0~200毫秒;总的周期:0.5~0.6秒。
5.根据权利要求1所述的基于UPLC‑Q‑TOF‑MS标记脂质的痕量鉴定大熊猫乳的方法,其特征在于:所述标记脂质为TG 8:0/8:0/10:0、TG 8:0/8:0/8:0、TG 8:0/8:0/12:0、TG 8:0/
10:0/12:0、TG 8:0/10:0/15:0、SHexCer 29:0;2O、PC 26:0、SHexCer 42:3;3O、SHexCer
38:5;3O、TG 16:0/16:0/18:1、SHexCer 36:3;2O、SM 40:1;3O。