1.一种基于COF薄膜和AgInS2量子点的光电化学生物传感器在双目标检测中的应用，其特征是：ITO电极表面原位生成2D COF有机骨架薄膜，产生强而稳定的光电PEC信号；通过在Au纳米粒子上负载大量AgInS2量子点，构建了一种放大的AuNPs‑AgInS2猝灭探针；经过目标HIV诱导的循环扩增过程产生大量DNA S0，S0通过DNA杂交将AuNPs‑AgInS2QDs探针修饰到电极上，猝灭PEC信号，实现对目标HIV的灵敏检测；再通过目标CEA与适体特异性结合，使AuNPs‑AgInS2QDs淬灭探针脱离电极，实现COF膜的PEC信号“on”，检测目标CEA；由下列步骤组成：步骤1.合成COF有机薄膜：取DHNDA和TAPA各1mg分别溶解在含有均三甲苯、乙醇和乙酸的混合溶液中，溶液配比为250μL、250μL、50μL；两种溶液按照1:1混合，然后迅速把混合溶液滴到ITO电极上，在真空常温下干燥10分钟，再浸没在二氯甲烷五分钟除去未反应的杂质；

步骤2.探针的合成以及目标循环放大过程：取1μL 2.14μM 3‑氨丙基三乙氧基硅烷加到50μL AuNPs中，在室温下搅拌2小时，让AuNPs修饰上氨基，然后离心洗涤；同时取200μL 

10mM的EDC跟20mM的NHS加入到100μL的AgInS2量子点中，对其羧基活化20分钟，然后离心洗涤；之后把活化好的AgInS2与AuNPs溶液混合，在37℃下孵育6小时；将孵育好的Au@AgInS2分散到300μL水溶液中；同时取200μL 10mM的EDC跟20mM的NHS加入到100μL的Au@AgInS2孵育

20分钟；把1.2μL 100mM H3与6μL 100mM DNA1加热到95℃并保持5min加入到上述溶液中，在37℃的摇床中恒温孵育6小时，合成Au@AgInS2/DNA探针；

H3:5’‑H2N‑(CH2)6‑TTC TAT TAC CTA GTA GCA TTC TTT CTC TTAACT TATTCGACCATA‑

3’

DNA1:5’‑H2N‑(CH2)6‑TCGATG TAC TGT GGG TAG GGC GGG‑3’将18.0μL 1.0μM的DNA H1在95℃下高温处理5分钟，然后缓慢冷却至室温，再加入18.0μL不同浓度的目标一HIV、20U外切酶三和4.0μL对应的10×缓冲溶液，在37℃下孵育2小时，得到大量产物链S0；

H1:5’‑C GAC TAT GCT TAC ACGACT TTT CATATG GTC GAA CGT GTA AGCATAGTC GGT GGAAAATCT CTA‑3’目标一HIV：5’‑ACT GCTAGAGAT TTT CCACAT‑3’

步骤3.双目标光电生物传感器的制备及其应用：将8μL 2mg/mL的DHNDA和TAPA迅速滴到洗净的ITO电极上，放置在真空干燥箱内常温干燥10分钟；使其在表面上形成均匀的COF薄膜；干燥完成后，再次浸没在二氯甲烷内5min除去未反应的杂质；自然干燥后，滴涂一层APTES使其氨基功能化，在其表面滴10μL 0.5μM带有羧基的H2‑DNA，在37℃湿润状态下孵育

6小时，接着加入10.0μL的MCH进行封板处理一小时；同时将5μL不同浓度的产物链S0与5μL 

0.8μM的Au@AgInS2/DNA探针在37℃下孵育2h，然后把S0与探针的结合物滴涂到电极上，接着在37℃下孵育2h，使探针结合到电极上，电极干燥后进行光电信号测量，检测目标一HIV；

H2：5’‑HOOC‑TAAG CTGATACGAATG TGC‑3’

如前面步骤制备修饰电极，再将最大浓度的目标一HIV的放大产物S0与信号猝灭探针连接后，在电极上孵育该连接物，检测淬灭之后的最低光电信号；再将10μL不同浓度的CEA溶液滴涂到电极上在37℃下孵育6小时；待电极干燥后进行光电信号的测量，检测目标二CEA。