1.一种基于光调控灵敏度的比率电化学适配体传感器的构建方法,其特征在于,步骤如下:(1)电极预处理:将金电极在H2SO4溶液中进行扫描处理,然后在乙醇和水中超声后于空气中自然干燥,得到处理后的金电极;
(2)将金纳米粒子溶液修饰在步骤(1)预处理后的金电极表面,在室温下自然晾干,修饰后的电极记为AuNPs/AuE;
(3)被巯基与亚甲基蓝修饰的适配体互补链,记为MB‑cDNA;将MB‑cDNA修饰在步骤(2)得到的AuNPs/AuE表面,并在一定温度条件下进行孵育,孵育后的材料记为MB‑cDNA/AuNPs/AuE;
(4)二茂铁标记的AFB1适配体,记为Fc‑apt;将Fc‑apt修饰在步骤(3)中MB‑cDNA/AuNPs/AuE表面,孵育后即得到比率电化学适配体传感器,记为Fc‑apt/MB‑cDNA/AuNPs/AuE,在可见光下产生增强的MB电化学信号。
2. 根据权利要求1所述的基于光调控灵敏度的比率电化学适配体传感器的构建方法,其特征在于,步骤(1)中,所述金电极的直径d=3 mm,H2SO4溶液的浓度为0.1M;所述扫描处理的方法为循环伏安法,扫描电压为‑0.3 1.4 V,扫描圈数为50圈;所述在乙醇和水中超声的~时间为30 60 s。
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3. 根据权利要求1所述的基于光调控灵敏度的比率电化学适配体传感器的构建方法,其特征在于,步骤(2)中,所述金纳米粒子溶液修饰的用量为6 µL;所述金纳米粒子溶液的浓度为5 nM。
4. 根据权利要求1所述的基于光调控灵敏度的比率电化学适配体传感器的构建方法,其特征在于,步骤(3)中,所述MB‑cDNA修饰的用量为6 8 µL,浓度为1 µM;所述孵育的温度~为4℃,孵育时间为10 14 h。
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5. 根据权利要求1所述的基于光调控灵敏度的比率电化学适配体传感器的构建方法,其特征在于,步骤(4)中,所述Fc‑apt修饰的用量为6 µL,浓度为2 µM;所述孵育的温度为4 ℃,孵育的时间为60 100 min。
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6.根据权利要求1 5任一项所述方法制备的传感器用于检测黄曲霉毒素B1的用途,其~特征在于,步骤如下:
S1、首先配制不同浓度的AFB1溶液,然后在比率电化学传感器Fc‑apt/MB‑cDNA/AuNPs/AuE表面依次修饰一定量不同浓度的AFB1溶液;室温下孵育后用Tris‑HCl溶液对电极进行清洗;得到修饰后的比率电化学适配体传感器;其中一个浓度的AFB1溶液对应修饰一个比率电化学适配体传感器;
S2、标准曲线的构建:以步骤S1修饰后的比率电化学适配体传感器为工作电极,饱和Ag/AgCl电极为参比电极,铂丝电极为对电极,利用外界光源对比率电化学适配体传感界面激发,并在激发过程中进行电化学测试,每一个浓度的AFB1修饰的电极对应获得MB与Fc的电化学信号,分别记为IMB和IFc;最后以两个信号的比值IMB/IFc与AFB1浓度的对数关系构建2
标准曲线;所述外界光源功率为500 mW/cm,距离工作电极的垂直距离为3 5cm;
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S3、样品中AFB1的检测:首先获取样品液,修饰一定量的样品液于工作电极表面,利用外界光源对比率电化学适配体传感界面激发,并在激发过程中进行电化学测试,通过电化学测试得到IMB和IFc,然后将IMB/IFc代入步骤S2构建的标准曲线,即可获知样品中AFB1的浓2
度,实现未知样品中AFB1的检测;所述外界光源功率为500 mW/cm ,距离工作电极的垂直距离为3 5 cm。
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7.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,步骤S1中,所述AFB1溶液的浓度为 0.5‑1 ~
1000 ng mL ;所述孵育时间为30 min;所述传感器表面修饰AFB1溶液的用量为6 µL。
8.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,步骤S2中电化学测试由型号为Autolab PGSTAT 302N的电化学工作站记录、检测;所述检测条件为在0.1 M PBS缓冲溶液中进行测试;扫描电压范围‑4 0.7 V,振幅为0.025 V,频率为25 Hz。
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9.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,步骤S3中所述样品液于传感器表面的用量为6 µL。