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专利号: 2022108720293
申请人: 安徽农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种检测四种猫腹泻相关病毒的多重荧光PCR引物探针组,其特征在于,包括:检测猫星状病毒的如SEQ ID NO:1‑2所示的引物组和如SEQ ID NO:3所示的探针;

检测猫博卡病毒1型的如SEQ ID NO:4‑5所示的引物组和如SEQ ID NO:6所示的探针;

检测猫库布病毒的如SEQ ID NO:7‑8所示的引物组和如SEQ ID NO:9所示的探针;

检测猫细小病毒的如SEQ ID NO:10‑11所示的引物组和如SEQ ID NO:12所示的探针。

2.根据权利要求1所述的多重荧光PCR引物探针组,其特征在于,所述探针5’端连接有荧光基团,3’端连接有猝灭基团,且,任一所述探针的所述荧光基团与其他三者荧光基团不同。

3.一种权利要求1所述的多重荧光PCR引物探针组在制备检测四种猫腹泻相关病毒产品中的应用。

4.一种检测猫腹泻相关病毒的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1‑2任一项所述的多重荧光PCR引物探针组。

5.一种检测四种猫腹泻相关病毒的多重荧光PCR方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)以待测样本的DNA或cDNA为模板,使用权利要求2所述的多重荧光PCR引物探针组或权利要求4所述的试剂盒进行PCR扩增;

(2)根据有无扩增曲线和Ct值,判断待测样本是否为四种猫腹泻相关病毒。

6.根据权利要求5所述的多重荧光PCR方法,其特征在于,若有扩增曲线,且满足Ct≤

35,说明待测样本为所述多重荧光PCR引物探针组的荧光基团对应的猫腹泻相关病毒;若无扩增曲线,说明待测样本不是四种病毒中的任何一种。

7.根据权利要求5所述的多重荧光PCR方法,其特征在于,所述PCR扩增的扩增体系包括以下组分:2X TaqMan Fast qPCR Master Mix 10μL,上下游引物各0.4μL,探针各0.2μL,模板DNA 1μL,ddH2O补足至20μL。

8.根据权利要求5所述的多重荧光PCR方法,其特征在于,所述PCR扩增的扩增程序为:

94℃预变性3min;94℃变性5s,60℃检测信号30s,循环40次。

9.一种如权利要求1‑2任一项所述的多重荧光PCR引物探针组或权利要求4所述的试剂盒在检测猫腹泻相关病毒中的应用。