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专利号: 2022108394716
申请人: 重庆医科大学附属儿童医院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-01
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种油红O染液,包含0.5%油红O(质量分数)、50%乙醇(体积分数)、5%‑10%水杨酸(质量分数)。

2.一种细胞油红O染色方法,包含以下步骤:步骤1:待测细胞种入培养皿或培养板,加入处理因素至检测时间点;

步骤2:吸弃培养基,PBS洗涤1‑2次,加入4%多聚甲醛固定20‑30分钟;

步骤3:吸弃固定液;PBS洗涤3次;

步骤4:配制如权利要求1所述油红O染液,滤纸或0.45μm滤器过滤后备用;

步骤5:吸弃PBS,加入50%乙醇15‑20秒;

步骤6:吸弃70%乙醇,加入步骤4的油红O染液,室温孵育10‑15分钟;

步骤7:吸弃油红O染液,加入50%乙醇分化15‑20秒;PBS洗涤3次直至液体澄清,置于显微镜下拍照;

步骤8:吸弃PBS,加入100%乙醇溶解油红O,加入50μl乙醇溶解液至96孔板中,酶标仪

492波长下检测OD值。

3.如权利要求2所述染色方法,其特征还在于:所述细胞为含有中性脂质的哺乳动物细胞。

4.一种组织油红O染色方法:包含以下步骤:步骤1:含有中性脂质的组织(肝脏、肾脏、脂肪、主动脉),取材后立即制备冰冻切片,切片厚度12μm;

步骤2:切片用4%多聚甲醛固定10分钟,蒸馏水洗涤5分钟,70%乙醇浸洗15‑20秒;

步骤3:配制如权利要求1所述油红O染液,滤纸或0.45μm滤器过滤后备用;

步骤4:油红O染液浸染10‑15分钟;

步骤5:70%乙醇分化至间质清晰,蒸馏水洗涤5分钟;

步骤6:苏木素复染3‑5分钟,蒸馏水洗涤5分钟;

步骤7:甘油明胶封片,显微镜下观察。