利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2022108025529
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-19
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种盐析辅助液‑液萃取与毛细管电泳在线富集法结合测定蒽醌类成分的方法,其特征在于,所述方法为:(1)盐析辅助液‑液萃取提取待测样品中的蒽醌类化合物

将有机溶剂和盐析剂加入待测样品中并涡旋,形成两相后,分离出有机层,挥干有机溶剂,用样品基质复溶,得到样品溶液;

所述有机溶剂为乙腈;

所述盐析剂为碳酸钠、碳酸钾、硫酸铵、硫酸镁、乙酸钠、氯化钠或氯化钾的水溶液;

所述盐析剂与有机溶剂的体积比为2:1 1:5;

~

所述涡旋的时间为20 40 s;

~

(2)三步富集法‑毛细管电泳检测样品中的蒽醌类化合物

对毛细管进行预处理,基于三步富集法‑毛细管电泳对步骤(1)所得样品溶液进行分析检测,得到样品溶液的毛细管电泳谱图;

毛细管的预处理方法为:新毛细管柱在使用之前依次用1mol/L NaOH、0.1 mol/L NaOH、纯水分别冲洗10~20min进行活化;在每日进样前,毛细管柱依次用0.1mol/L NaOH、纯水、背景缓冲液分别冲洗5~10min;在每两次样品分析运行之间,毛细管柱依次用

0.1mol/L NaOH、纯水、背景缓冲液分别冲洗3~5min以保持分析的重现性,且每两次运行后及时更换新的背景缓冲液;

电泳分析条件为:以15 30 mmol/L四硼酸钠作为背景缓冲液,并在背景缓冲液中添加~

15 50 mmol/L羟丙基‑β‑环糊精和体积分数10 20%甲醇,调节pH至9‑9.5;以12 mmol/L磷酸~ ~氢二钠缓冲液作为样品基质,pH=4.1;50 mbar压力注入样品溶液,样品溶液进样时间为100

400 s,进样结束后施加分离电压为+20 kV,温度为25℃,检测波长为250 nm;

~

(3)样品中的蒽醌类化合物的定量

配制浓度范围100 3000 ng/mL大黄酚、大黄素和橙黄决明素的混合标准溶液,在步骤~(2)的电泳分析条件下进行检测,平行测定三次,得到混合标准溶液的毛细管电泳谱图,以所得谱图中各标准品的峰面积为纵坐标、混合标准溶液中标准品的浓度为横坐标分别绘制大黄酚、大黄素和橙黄决明素的标准曲线,完成标准曲线的构建;

将步骤(2)所得样品溶液的毛细管电泳谱图中大黄酚、大黄素和橙黄决明素的峰面积代入标准曲线,进而计算获得样品中大黄酚、大黄素和橙黄决明素的含量。

2.如权利要求1所述的盐析辅助液‑液萃取与毛细管电泳在线富集法结合测定蒽醌类成分的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述待测样品为:决明子茶或加标尿样。

3.如权利要求1所述的盐析辅助液‑液萃取与毛细管电泳在线富集法结合测定蒽醌类成分的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述盐析剂为2 mol/L硫酸铵水溶液。

4.如权利要求1所述的盐析辅助液‑液萃取与毛细管电泳在线富集法结合测定蒽醌类成分的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述盐析剂与有机溶剂的体积比为1:1。

5.如权利要求1所述的盐析辅助液‑液萃取与毛细管电泳在线富集法结合测定蒽醌类成分的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述涡旋的时间为30 s。

6.如权利要求1所述的盐析辅助液‑液萃取与毛细管电泳在线富集法结合测定蒽醌类成分的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述电泳分析条件为:以25 mmol/L四硼酸钠作为背景缓冲液,并在背景缓冲液中添加35 mmol/L羟丙基‑β‑环糊精和体积分数15%甲醇,调节pH至9.3;以12 mmol/L磷酸氢二钠缓冲液作为样品基质,pH=4.1;50 mbar压力注入样品溶液

300s,分离电压为+20 kV,温度为25℃,检测波长为250 nm。