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专利号: 2022107826784
申请人: 山东省分析测试中心
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-11-06
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种多糖类胰蛋白酶抑制剂的制备方法,其特征在于,包括:将六神曲加入水中,超声提取,冷却、过滤,得到六神曲提取液;

将所述六神曲提取液浓缩、醇沉,得到粗多糖沉淀;

将所述粗多糖沉淀加水溶解,固液分离,取上清液,去除蛋白质;

将除去蛋白质的粗多糖采用阴离子交换层析色谱进行纯化、透析,得到多糖溶液;

将所述多糖溶液冻干,得到多糖类胰蛋白酶抑制剂提取物。

2.如权利要求1所述的多糖类胰蛋白酶抑制剂的制备方法,其特征在于,所述超声提取的条件为:固液比为1:80~1:100,超声功率200~300W,时间40~60min,超声温度70~90℃。

3.如权利要求1所述的多糖类胰蛋白酶抑制剂的制备方法,其特征在于,醇沉采用的乙醇浓度为75~85%,时间为24~48h。

4.如权利要求1所述的多糖类胰蛋白酶抑制剂的制备方法,其特征在于,采用Sevag法去除蛋白质,Sevag试剂为正丁醇和三氯甲烷,二者的体积比为1:4。

5.如权利要求1所述的多糖类胰蛋白酶抑制剂的制备方法,其特征在于,Sevag试剂与与粗多糖溶液以1:1~1:4混合,除蛋白质5‑7次。

6.如权利要求1所述的多糖类胰蛋白酶抑制剂的制备方法,其特征在于,所述纯化采用DEAE‑52阴离子交换色谱柱,用蒸馏水进行洗脱,流速为1.0~1.2mL/min,以50mL/管收集组分,利用苯酚硫酸法于490nm波长下测定吸光度。

7.如权利要求1所述的多糖类胰蛋白酶抑制剂的制备方法,其特征在于,所述透析采用截留分子量为3500Da的透析袋,透析48~96小时。

8.如权利要求1‑7任一项所述的方法制备的多糖类胰蛋白酶抑制剂。

9.如权利要求8所述的多糖类胰蛋白酶抑制剂,其特征在于,主要成分为多糖,包括:阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖。

10.一种多糖类胰蛋白酶抑制剂的活性测定方法,其特征在于,包括:胰蛋白酶溶液中加入权利要求8或9所述的多糖类胰蛋白酶抑制剂,混合均匀后,孵育,再加入Tris‑HCl溶液和N‑苯甲酰‑DL‑精氨酸对硝基苯酰胺盐酸盐,混合均匀后,孵育,孵育后加入乙酸中止反应,在405nm波长下测定吸光度评价胰蛋白酶抑制活性。