1.一种基于大米蛹虫草子实体制备虫草素和降血压肽的方法,其特征在于:将大米蛹虫草子实体研磨成粉末,置于水中超声处理,为了虫草素和蛋白质更充分溶解,过滤后向滤液中加入PEG和无机盐,使溶液形成双水相,上相经超滤膜分离回收PEG和虫草素,下相经超滤膜分离回收粗蛋白和无机盐,粗蛋白经离子液体强化的固定化酶微流场水解后,经超滤和多步层析后得到降血压肽。
2.根据权利要求1所述的一种基于大米蛹虫草子实体制备虫草素和降血压肽的方法,其特征在于:具体包括以下步骤:S1:将新鲜的大米虫草子实体烘干后粉碎,过60目筛,得粉末;
S2:将粉末置于水中搅拌成悬浊液,超声处理得悬浮液,保证虫草素和蛋白质更充分溶解;
S3:将悬浊液过滤得澄清滤液,再向滤液中加入的PEG和无机盐,搅拌后静置,待PEG溶解后分层得双相体系产物,其中,无机盐、PEG和滤液的质量比为(1‑35):(20‑30):100,pH范围4.5‑7;
S4:对双相体系产物进一步纯化,其中,上相产物经超滤处理后,将分子量大的溶液烘干回收PEG,分子量小的溶液经萃取、冻干、结晶和重结晶获得高纯度虫草素;下相产物经超滤膜将分子量小的溶液烘干回收无机盐,分子量大的溶液冻干获得大米蛹虫草子实体粗蛋白;
S5:将粗蛋白和浓度为0.5‑1000mM的铵离子液体分别配成混合溶液后,通入到装有固定化蛋白酶的微通道的微反应器中,水解制得多肽溶液;粗蛋白和离子液体水溶液的料液比为1:10‑70;
S6:用活性炭对多肽溶液进行脱色;
S7:脱色后的多肽溶液经超滤、阳离子交换层析和凝胶层析得高活性组分,经液质联用鉴定活性肽结构。
3.根据权利要求2所述的一种基于大米蛹虫草子实体制备虫草素和降血压肽的方法,其特征在于,步骤S1中烘干温度为55℃。
4.根据权利要求2所述的一种基于大米蛹虫草子实体制备虫草素和降血压肽的方法,其特征在于,步骤S2中悬浊液的料液比为5:20,超声处理的频率为50Hz,超声时间为3h,超声处理的次数为2,超声温度为50℃,溶液pH为5‑6,2次提取液合并。
5.根据权利要求2所述的一种基于大米蛹虫草子实体制备虫草素和降血压肽的方法,其特征在于,步骤S3中PEG的分子量为1000‑10000Da,无机盐为硫酸铵和/或氯化钠、磷酸氢二钠、或硫酸钠。
6.根据权利要求2所述的一种基于大米蛹虫草子实体制备虫草素和降血压肽的方法,其特征在于:步骤S4中使用的超滤膜均为5 kDa,使用乙酸乙酯萃取上相小分子溶液,除去乙酸乙酯层,冷冻干燥剩下的液体,使用60℃热乙醇溶解冻干后的粉末,在0℃结晶,再重结晶,然后抽滤分离结晶产物,洗涤烘干得虫草素晶体;下相小分子溶液烘干回收PEG和无机盐,下相大分子溶液冻干得粗蛋白。
7.根据权利要求2所述的一种基于大米蛹虫草子实体制备虫草素和降血压肽的方法,其特征在于:步骤S5中铵离子液体为1‑辛基‑3‑甲基咪唑四氟硼酸盐、1‑丁基‑3‑甲基咪唑甲磺酸、1‑丁基‑3‑甲基咪唑三氟甲磺酸盐、1‑丁基‑3‑甲基吡啶四氟硼酸盐、氯化胆碱、或四甲基溴化铵;固定化蛋白酶的酶为碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶或风味蛋白酶。
8.根据权利要求2所述的一种基于大米蛹虫草子实体制备虫草素和降血压肽的方法,其特征在于:步骤S6中活性炭的添加量0.1‑3.5%,脱色温度30‑60℃,脱色时间0.5‑2.5h,脱色pH 3.5‑7。
9.根据权利要求2所述的一种基于大米蛹虫草子实体制备虫草素和降血压肽的方法,其特征在于:步骤S7中所用的超滤膜为5 kDa,阳离子交换层所用的树脂为大孔树脂YK200,析洗脱液为A液0.01M盐酸溶液和B液0.01M氢氧化钠溶液,洗脱流速为1.5 mL收集第三个馏分,凝胶层析所用的色谱G‑15,且洗脱液为纯水,洗脱流速为1.5 mL,收集第三个馏分。