1.基于噬菌体识别的食源性致病菌纳米酶侧流层析检测方法，其中纳米酶探针Van‑BSA‑SFe3O4 NPs作为第一识别元件用于捕获样品中的革兰氏阳性食源性致病菌，该纳米酶探针由羧基化四氧化三铁纳米粒子SFe3O4 NPs、万古霉素Van和牛血清蛋白BSA组成，通过Van与细菌表面D‑丙氨酰‑D‑丙氨酸分子形成的五个氢键而特异性识别革兰氏阳性菌；纸基层析试纸条包括底板，底板上依次有样品垫、吸收垫和NC膜，NC膜的特征在于涂有一条包被有纯化食源性致病菌噬菌体尾丝蛋白TFP的检测线；TFP作为第二识别元件对待测致病菌进行特异性捕获，同时纳米酶会堆积在检测线上；利用SFe3O4 NPs对DAB/H2O2的过氧化物酶活性催化产生棕色不溶物，显色强度与样品中待测致病菌浓度呈正比，从而实现对待测致病菌的可视化检测。

2.基于噬菌体识别的食源性致病菌纳米酶侧流层析检测方法，层析试纸条的制备方法包括如下步骤：

1)纳米酶探针的制备：称取20mg SFe3O4 NPs溶于0.01mol/L无菌PBS溶液，在外加磁场的作用下，充分洗涤SFe3O4 NPs，并将收集的SFe3O4 NPs重悬于PBS溶液中；加入6.5mg NHS和5.8mg EDC至重悬液中于室温下避光活化1h，将活化后的SFe3O4 NPs再次用无菌PBS洗涤重悬，加入24mg BSA，室温下反应2h，洗涤重悬，得到BSA‑SFe3O4 NPs溶液；在BSA‑SFe3O4 NPs溶液中加入200mg活化后的Van，混合均匀，室温下避光孵育6h，在外加磁场作用下洗涤并重悬于PBS溶液中，得到Van‑BSA‑SFe3O4 NPs纳米酶探针；

2)噬菌体尾丝蛋白提取：用试剂盒提取单增李斯特菌噬菌体A511的DNA，从NCBI上查询噬菌体A511基因组序列，其登记号为NC_009811.2，根据尾丝蛋白基因序列设计引物；以噬菌体DNA为模板，以引物进行PCR扩增，获得尾丝蛋白编码基因片段；用北京全式金生物有限公司 ‑Blunt E1 Expression Kit试剂盒进行重组质粒的构建，重组质粒进行PCR扩增和测序验证；将测序结果正确的重组质粒转到大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞中，加入IPTG诱导剂进行尾丝蛋白诱导表达，通过SDS‑PAGE电泳观察蛋白条带，并采用Ni‑NTA纯化系统纯化蛋白；

3)层析试纸条组装：将NC膜黏贴到底板上，再由底板的一侧向另一侧依次黏贴样品垫和吸收垫，样品垫和吸收垫分别与NC膜重叠2mm；将35μL尾丝蛋白溶液喷涂在试纸条NC膜上形成检测线，将已喷好的试纸条放在室温下，待喷涂的蛋白晾干；用切条机将试纸条切成

3.8mm宽，将制备好的试纸条放入装有干燥剂的包装袋内并置于4℃保存。

3.根据权利要求2所述基于噬菌体识别的食源性致病菌纳米酶侧流层析检测方法，其特征在于，所述步骤2)中，根据噬菌体尾丝蛋白基因序列设计引物：F：5'‑ATGAGTGATGTAGAATCAGG‑3'，R：5'‑CTGCTTTAGAAAATAGCTGA‑3'。

4.根据权利要求2所述基于噬菌体识别的食源性致病菌纳米酶侧流层析检测方法，其特征在于，所述步骤3)中，所用尾丝蛋白溶液浓度为10mg/mL。

5.根据权利要求2所述的基于噬菌体识别的食源性致病菌纳米酶侧流层析检测方法，其特征在于，该制备方法还包括：

4)SFe3O4 NPs的制备：将0.015mol无水NaAc加到15mL乙二醇中超声溶解，再将0.004mol FeCl3·6H2O、0.2g柠檬酸钠和0.2g PEG 6000溶于15mL乙二醇中后加到醋酸钠溶液中，超声溶解后在剧烈的磁力下剧烈搅拌，转入带有聚四氟内衬的不锈钢反应釜中反应；冷却至室温后将产物用去离子水和无水乙醇洗涤数次，再放入60℃烘箱中干燥12h以获得含羧基的Fe3O4 NPs即SFe3O4 NPs；

5)万古霉素的活化：将200mg万古霉素溶解于2mL无菌PBS溶液中，再加入47.89mg NHS和169.3mg EDC，在室温下避光反应10min。

6.根据权利要求2所述的基于噬菌体识别的食源性致病菌纳米酶侧流层析检测方法，其特征在于，该层析试纸条的应用方法为：在1mL待测样品中加入纳米酶探针，置于摇床中孵育，后进行磁分离，再用100μL PBS溶液重悬获得菌‑Van‑BSA‑SFe3O4 NPs复合物；将样品垫放入上述菌‑Van‑BSA‑SFe3O4 NPs重悬液中，重悬液向吸收垫迁移；10min后，将试纸条放入另一个装有500μL NaAc、10μL 30％H2O2和10μL 10mg/mL DAB的试管中反应6min，用去离子水快速冲洗试纸条以终止反应；通过肉眼观察显色情况，判读结果：阴性反应：检测线不显色；阳性反应：检测线显色。

7.根据权利要求6所述基于噬菌体识别的食源性致病菌纳米酶侧流层析检测方法，其特征在于，摇床孵育条件为37℃，200r/min，60min，磁分离时间为7min。

8.根据权利要求6所述基于噬菌体识别的食源性致病菌纳米酶侧流层析检测方法，其特征在于，纳米酶探针用量为100μL。