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专利号: 2022102364191
申请人: 江苏大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2024-12-24
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种监测细胞内质网中pH值动态变化的比率型近红外荧光探针,其特征在于,其结构如下:

2.一种如权利要求1所述的监测细胞内质网中pH值动态变化的比率型近红外荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤如下:步骤1、称取2,3,3‑三甲基‑5‑硝基吲哚溶于乙腈中,接着加入2‑溴乙醇,搅拌均匀,再加入碘化钾,将混合液加热回流搅拌反应;反应结束后冷却至室温,除去多余的溶剂,将沉淀物抽滤后得滤饼并用乙腈洗涤,得中间产物A;

步骤2、将步骤1得到的中间产物A、氯化亚锡二水合物和盐酸溶液混合物在回流状态下搅拌和加热,冷却至室温后,在冰水浴下用氢氧化钠溶液调pH至中性,用蒸馏水和乙酸乙酯进行萃取分液,将有机层回收,除去多余的溶剂,柱层析纯化即可得到中间产物B;

步骤3、将步骤2得到的中间产物B和对甲苯磺酰氯溶解于二氯甲烷中,搅拌均匀,再滴加三乙胺,随后混合物在室温下搅拌反应,反应结束后除去多余的溶剂,柱层析纯化即可得到中间产物C;

步骤4、将7‑(二乙氨基)香豆素‑3‑甲醛和步骤3得到的中间产物C加入到乙腈中,将混合物加热回流搅拌反应,待混合物冷却至室温后,除去多余的溶剂;通过柱层析法纯化即可得到监测细胞内质网中pH值动态变化的比率型近红外荧光探针。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤1中,所述2,3,3‑三甲基‑5‑硝基吲哚、乙腈、2‑溴乙醇、碘化钾的用量比为0.5g~1g:6mL~8mL:192μL~200μL:0.2g~

0.25g。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤1中,所述加热回流搅拌反应的温度为95~100℃,时间为23~24h。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤2中,所述中间产物A、氯化亚锡二水合物、盐酸溶液的用量比为0.2g~0.3g:0.48g~0.5g:6mL~8mL;所述盐酸溶液的体积百分浓度为38%。

6.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤2中,所述回流状态下搅拌和加热的温度为95~100℃,时间为2~3h。

7.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤3中,所述中间产物B、对甲苯磺酰氯、二氯甲烷、三乙胺的用量比为0.3g~0.5g:0.26g~0.4g:5mL~6mL:2μL~3μL。

8.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤3中,所述室温反应的时间为1~

2h,所述除去溶剂的方法为旋转蒸发。

9.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤4中,所述7‑(二乙氨基)香豆素‑

3‑甲醛、中间产物C、乙腈的用量比为0.5g~1g:0.76g~1g:5mL~6mL;所述加热回流搅拌反应的温度为95~100℃,时间为12~13h。