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专利号: 2022101902657
申请人: 广东菲鹏生物有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-11-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种瓜氨酸肽,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2‑9中的任意一种所示,序列表中Xaa代表瓜氨酸。

2.根据权利要求1所述的瓜氨酸肽,其特征在于,所述瓜氨酸肽第4位半胱氨酸残基与第17位的半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。

3.瓜氨酸肽作为类风湿关节炎的抗原在制备类风湿关节炎检测试剂中的应用,其特征在于,所述瓜氨酸肽的氨基酸序列选自SEQ ID NO.2‑9中的至少一种,序列表中Xaa代表瓜氨酸。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述瓜氨酸肽选自SEQ ID NO.2和8的组合。

5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,SEQ ID NO.2‑9中任意一者所示的瓜氨酸肽的第4位半胱氨酸残基与第17位的半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。

6.一种用于检测类风湿关节炎的抗原,其特征在于,其包括如SEQ ID NO.2‑9中的任意一种或几种所示的瓜氨酸肽,序列表中Xaa代表瓜氨酸。

7.根据权利要求6所述的抗原,其特征在于,所述抗原选自SEQ ID NO.2和8的组合。

8.根据权利要求6所述的抗原,其特征在于,SEQ ID NO.2‑9中任意一者所示的瓜氨酸肽的第4位半胱氨酸残基与第17位的半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。

9.一种类风湿关节炎的检测试剂,其特征在于,其包括氨基酸序列如SEQ ID NO.2‑9中的任意一种或几种所示的瓜氨酸肽,序列表中Xaa代表瓜氨酸。

10.根据权利要求9所述的检测试剂,其特征在于,所述瓜氨酸肽以偶联于固相颗粒上的形式存在。

11.根据权利要求10所述的检测试剂,其特征在于,所述固相颗粒为磁珠或乳胶微粒。

12.根据权利要求10所述的检测试剂,其特征在于,所述固相颗粒表面带有修饰基团,所述修饰基团选自如下基团中的至少一种:氨基、羧基、甲苯磺酰基和环氧基。

13.根据权利要求11所述的检测试剂,其特征在于,所述磁珠表面修饰有氨基或羧基,所述瓜氨酸肽通过偶联剂偶联于所述磁珠表面。

14.根据权利要求13所述的检测试剂,其特征在于,所述磁珠表面修饰有氨基或羧基,所述瓜氨酸肽通过偶联剂偶联,当所述磁珠表面修饰有羧基时,所述偶联剂选自EDC和NHS中的至少一种;当所述磁珠表面修饰有氨基时,所述偶联剂选自SMCC、Sulfo‑SMCC、SMPEG2、SMPEG4、SMPEG 6、SMPEG8、SMPEG12、SMPEG 24、LC‑SMCC、2‑IT、STAT和STAP中的至少一种。

15.如权利要求9‑14中任一项所述的检测试剂的制备方法,其特征在于,其包括:获得SEQ ID NO.2‑9中的任意一种或几种所示的瓜氨酸肽,序列表中Xaa代表瓜氨酸。

16.根据权利要求15所述的检测试剂的制备方法,

包括:将获得的所述瓜氨酸肽与固相颗粒混合以使所述瓜氨酸肽偶联至所述固相颗粒上;

所述固相颗粒为磁珠或乳胶微粒;

所述固相颗粒表面带有修饰基团,所述修饰基团选自如下至少一种:氨基、羧基、甲苯磺酰基和环氧基。

17.根据权利要求16所述的检测试剂的制备方法,其中

所述固相颗粒为磁珠,所述磁珠修饰有羧基或氨基;

每mg所述磁珠对应加入5‑100μg所述瓜氨酸肽进行混合;

加入所述瓜氨酸肽后,将得到的混合体系置于15‑45℃条件下反应15‑300min。

18.根据权利要求17所述的检测试剂的制备方法,其中

每mg所述磁珠对应加入10‑50μg所述瓜氨酸肽进行混合;

加入所述瓜氨酸肽后,将得到的混合体系置于15‑45℃条件下反应30‑120min。

19.根据权利要求16所述的制备方法,其特征在于,在将所述瓜氨酸肽与所述磁珠混合之前,所述制备方法还包括:活化步骤;

所述活化步骤包括:用缓冲液重悬所述磁珠,往重悬液中加入偶联剂进行活化;

当所述磁珠表面修饰有羧基时,所述偶联剂选自EDC和NHS中的至少一种;当所述磁珠表面修饰有氨基时,所述偶联剂选自SMCC、Sulfo‑SMCC、SMPEG2、SMPEG4、SMPEG 6、SMPEG8、SMPEG12、SMPEG 24、LC‑SMCC、2‑IT、STAT和STAP中的至少一种;

所述缓冲液为Mes或PBS。

20.一种类风湿关节炎的检测试剂盒,其特征在于,其包括权利要求1或2所述的瓜氨酸肽、权利要求6、7或8所述的抗原或者权利要求9、10、11、12、13、或14所述的检测试剂。