1.一种单细胞活性蓝藻的快速计数方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.配制一系列梯度浓度的蓝藻藻液;
S2.采用浮游植物荧光仪对上述配制的一系列梯度浓度的蓝藻藻液进行检测,获得各样品中蓝藻藻液的叶绿素浓度;
S3.从上述多组蓝藻藻液中选择叶绿素浓度在30‑100μg/L范围内的一组蓝藻藻液,将其平均分为两份,其中一份加入鲁戈试剂进行固定,另一份不处理;接着,对两份蓝藻藻液样品进行死亡细胞染色镜检,分别得出每一样品中的总细胞数和死亡细胞数,将总细胞数减去死亡细胞数,通过换算即可获得各样品中蓝藻活细胞的数目;
S4.根据步骤S2和S3中测试得到的数据,建立叶绿素浓度与蓝藻活细胞的数目之间的标准曲线;
S5.采用浮游植物荧光仪测试待测蓝藻样品的叶绿素浓度,代入步骤S4中的标准曲线,计算得出待测蓝藻样品中活细胞的数目。
2.根据权利要求1所述的一种单细胞活性蓝藻的快速计数方法,其特征在于,步骤S1中,所述蓝藻包括铜绿微囊藻和水华微囊藻。
3.根据权利要求1所述的一种单细胞活性蓝藻的快速计数方法,其特征在于,步骤S1中,所述一系列梯度浓度的蓝藻藻液的配制方法为:取一定量的蓝藻藻液,分别稀释1倍、10倍、100倍、1000倍和10000倍,得到所述梯度浓度的蓝藻藻液。
4.根据权利要求1所述的一种单细胞活性蓝藻的快速计数方法,其特征在于,步骤S2中,测试蓝藻藻液的叶绿素浓度时,每个浓度重复测试3次,结果取平均值。
5.根据权利要求1所述的一种单细胞活性蓝藻的快速计数方法,其特征在于,步骤S3中,所述死亡细胞染色镜检的方法为:将蓝藻藻液离心后,采用磷酸盐缓冲液清洗、重悬后,采用碘化丙啶溶液进行染色;染色结束后,采用磷酸盐缓冲液清洗,并取一定量的藻液于血球计数板中,进行显微镜镜检,计数染色成红色的细胞数,即为死亡细胞数。
6.根据权利要求5所述的一种单细胞活性蓝藻的快速计数方法,其特征在于,步骤S3中,对所述蓝藻藻液进行离心时,离心速度为3000~4000rpm,离心时间为2~3min。
7.根据权利要求5所述的一种单细胞活性蓝藻的快速计数方法,其特征在于,步骤S3中,采用碘化丙啶溶液进行染色的方法为:向重悬后的蓝藻藻液中加入碘化丙啶溶液,控制碘化丙啶的浓度为400μg/mL,室温下染色5min。
8.根据权利要求5所述的一种单细胞活性蓝藻的快速计数方法,其特征在于,所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.2M,pH值为7.0,其配制方法为:分别配制摩尔浓度均为0.2mol/L的Na2HPO4溶液和NaH2PO4溶液,按照61:39的体积比将Na2HPO4溶液和NaH2PO4溶液混合,即得到所述磷酸盐缓冲液。