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专利号: 2021116433845
申请人: 广东省科学院健康医学研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种大鼠非酒精性脂肪性肝病肝脂肪变性模型构建的方法,包含以下步骤:S1:将大鼠原代肝细胞贴附培养;

S2:将大鼠肝星状细胞或人皮肤成纤维细胞消化后离心并弃去上清;

S3:将步骤S2中大鼠肝星状细胞或人皮肤成纤维细胞接种至S1培养的肝细胞中诱导培养;

所述大鼠肝星状细胞为 HSC‑T6;或所述人皮肤成纤维细胞为HFF‑1;

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步骤S1的具体操作为:将重悬的原代肝细胞按7.5~10.5×10/cm的密度贴附培养;

步骤S1所述的贴附培养的培养液为包含胰岛素的低糖培养液;

所述胰岛素的浓度为3.125~9.375μg/mL;

所述低糖培养液为DMEM低糖培养液;

步骤S3所述的诱导培养的分化培养液为包含胰岛素的高糖培养液;

所述胰岛素的浓度为3.125~9.375μg/mL;

所述高糖培养液为DMEM高糖培养液;

步骤S3中所述的肝星状细胞或人皮肤成纤维细胞与肝细胞的数目比为1:5~6;

步骤S1中所述的贴附培养条件为36~38℃;20~28h;

步骤S3中所述的诱导培养的条件为36~38℃;10~15天。

2.权利要求1所述的方法构建的非酒精性脂肪性肝病肝脂肪变性模型在(I)或(II)中的应用:(I)用于肝脂肪变性发病过程、机制及非酒精性脂肪性肝病疾病进程的研究;

(II)筛选用于预防、治疗非酒精性脂肪性肝病肝脂肪变性疾病药物。

3.一种筛选非酒精性脂肪性肝病肝脂肪变性药物的方法,使用权利要求1所述的方法制备的模型进行药物筛选。