1.一种用于发酵转化亚硒酸钠制备纳米硒的重组酿酒酵母工程菌,其特征在于所述重组酿酒酵母工程菌是将Sec13p基因、Sso1p基因插入酿酒酵母的单拷贝位点YPRCΔ15构建获得的;
所述Sec13p基因使用强启动子tTDH3,所述Sso1p基因使用强启动子tTEF1;
所述Sec13p基因核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示;所述Sso1p基因核苷酸序列为SEQ ID NO:2所示;所述tTDH3核苷酸序列为SEQ ID NO:4所示;所述tTEF1核苷酸序列为SEQ ID NO:
5所示。
2.如权利要求1所述重组酿酒酵母工程菌,其特征在于所述重组酿酒酵母工程菌的构建采用的载体是将质粒p426_Cas9_gRNA‑HIS3b中的URA3片段用潮霉素抗性基因替换,再将
20bp gRNA靶标序列替换成靶标序列AAGTAACTCTACTCCGCCTG;所述潮霉素抗性基因核苷酸序列为SEQ ID NO:6所示。
3.如权利要求2所述重组酿酒酵母工程菌,其特征在于所述重组酿酒酵母工程菌是将下列片段依次连接后转入酿酒酵母菌株中构成:单拷贝靶位点YPRCΔ15上游同源臂、启动子tTDH3、基因Sec13p、启动子tTEF1、基因Sso1p、单拷贝靶位点YPRCΔ15下游同源臂;所述YPRCΔ15上游同源臂核苷酸序列为SEQ ID NO:3所示;所述YPRCΔ15下游同源臂核苷酸序列为SEQ ID NO:7所示。
4.如权利要求3所述重组酿酒酵母工程菌,其特征在于所述酿酒酵母为中国工业微生物菌种保藏管理中心编号为1406的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌株。
5.一种权利要求1所述重组酿酒酵母工程菌在发酵转化亚硒酸钠制备纳米硒中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述应用的方法为:将重组酿酒酵母工程菌接种至含亚硒酸钠的YPD液体培养基中,28‑31℃、150‑250r/min发酵培养,获得含纳米硒的发酵液,将发酵液分离纯化,获得纳米硒。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述YPD液体培养基中亚硒酸钠含量为1600‑
2200mg/L。
8.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述重组酿酒酵母工程菌发酵前,先进行斜面活化和种子扩大培养,再将种子液以体积浓度8‑15%的比例接种至YPD液体培养基中,方法为:将重组酿酒酵母工程菌接种至YPD固体培养基,30℃培养24h进行活化,获得活化菌种;
挑取一环活化的菌种于YPD液体培养基中,30℃震荡培养15h,作为种子液;YPD固体培养基组成:酵母粉10g/L、蛋白胨20g/L、葡萄糖20g/L、琼脂20g/L,溶剂为去离子水,pH自然;YPD液体培养基组成:酵母粉10g/L、蛋白胨20g/L、葡萄糖20g/L,溶剂为去离子水,pH自然。