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专利号: 2021112948645
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)将磁性分子印迹纳米酶与待测样品混合后,经震荡吸附得到诺氟沙星吸附溶液;

(2)将所述诺氟沙星吸附溶液与缓冲液、过氧化物、显色底物混合后经反应I得到反应液I,测定所述反应液I的吸光度值,从而测得所述待测样品中的诺氟沙星含量;

所述磁性分子印迹纳米酶的制备方法包括如下步骤:

S1、将含有可溶性三价铁盐的水溶液除氧后,与可溶性二价铁盐、碱溶液混合进行反应II得到反应液II,将所述反应液II经磁分离I收集得到四氧化三铁纳米粒子;

S2、将所述四氧化三铁纳米粒子经四甲基氢氧化铵活化后,与3‑氨丙基三乙氧基硅烷混合进行反应III,得到表面氨基化四氧化三铁纳米粒子,所述反应III的条件包括:以通入氮气的方法进行除氧并进行暗反应;

S3、将所述表面氨基化四氧化三铁纳米粒子、诺氟沙星与多巴胺混合进行反应IV后,经磁分离II收集得到所述磁性分子印迹纳米酶。

2.根据权利要求1所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,步骤(1)中所述震荡吸附的条件至少满足:转速为80‑120rpm、时间为10‑15min。

3.根据权利要求1所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,步骤(2)中所述缓冲液为乙酸‑乙酸盐缓冲液,所述过氧化物为过氧化氢,所述显色底物为3,

3',5,5'‑四甲基联苯胺;

所述反应I的条件至少满足:温度为20‑30℃、反应时间为3‑6min。

4.根据权利要求1至3中任意一项所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,相对于1g的所述磁性分子印迹纳米酶,所述待测样品的用量为100‑150mL、所述缓冲液的用量为500‑850mL、所述过氧化物的用量为10‑20mmol、所述显色底物的用量为

0.2‑1mmol。

5.根据权利要求1所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,步骤S1中所述可溶性三价铁盐、所述可溶性二价铁盐与所述碱溶液中的碱的摩尔比为1:

0.35‑0.8:3.5‑5.5;

所述可溶性三价铁盐选自氯化铁、硫酸铁和硝酸铁中的至少一种,所述可溶性二价铁盐选自氯化亚铁、硫酸亚铁和硝酸亚铁中的至少一种,所述碱溶液选自氢氧化钠‑水溶液、氢氧化钾‑水溶液和氨水中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,步骤S1中所述反应II的条件至少满足:以通入氮气的方法进行除氧,温度为75‑85℃、搅拌速率为500‑600rpm、反应时间为0.5‑1.5h。

7.根据权利要求6所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,步骤S1还包括:将所述磁分离I得到的固体A利用水洗涤至pH为6‑7,再经真空干燥得到所述四氧化三铁纳米粒子。

8.根据权利要求1所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,步骤S2中,相对于1g的所述四氧化三铁纳米粒子,所述3‑氨丙基三乙氧基硅烷的用量为2‑

5mL;

所述反应III的反应溶剂为乙醇‑水溶液。

9.根据权利要求8所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,所述反应III的条件至少满足:温度为30‑50℃、搅拌速率为300‑400rpm、反应时间为7‑12h。

10.根据权利要求1所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,步骤S3中,相对于1重量份的所述诺氟沙星,所述表面氨基化四氧化三铁纳米粒子的用量为

16‑65重量份、所述多巴胺的用量为5‑16重量份;

所述反应IV的反应溶剂为乙醇‑Tris‑HCl溶液。

11.根据权利要求10所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,所述反应III的条件至少满足:温度为20‑30℃、搅拌速率为250‑350rpm、反应时间为1‑3h。

12.根据权利要求1所述的基于比色化学传感技术检测诺氟沙星的方法,其特征在于,步骤S3还包括:将所述磁分离II得到的固体B利用乙醇‑乙酸溶液洗涤4‑6次,再用水洗涤2‑

3次,最后经真空干燥得到所述磁性分子印迹纳米酶。