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专利号: 2021109526239
申请人: 河北工程大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-30
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种恒流弱电场胁迫下海水非灭菌高渗发酵甘油生产D‑阿拉伯糖醇的方法,其特征在于:将非灭菌高渗发酵培养基注入发酵罐中,并将正、负石墨电极浸入非灭菌高渗发酵培养基液面以下,保证其与发酵罐体绝缘,在正、负石墨电极接入可调节恒流直流电源,调节电流为恒流模式,控制发酵液电流强度为250~350mA;并以发酵液体积8%~10%的接种量,将种子液接入非灭菌高渗发酵培养基,在28~30℃、搅拌转速500~800rpm、通气量0.5~1.2vvm下,恒温发酵;发酵过程中,使用4.0~6.0mol/L的氨水维持发酵液pH值为3.0±

0.1,同时每隔6~12h补加甘油,维持发酵液渗透压在3.9±0.002~4.5±0.002Osmol/kg,直至发酵结束;

所述非灭菌高渗发酵培养基是:甘油150~250g/L,(NH4)SO4 3.0~3.7g/L,酵母浸粉

1.0~3.0g/L,玉米浆粉1.0~3.0g/L,MgSO4·7H2O 0.5~1.0g/L,KH2PO4 0.5~2.0g/L,CaCl2 0.2~0.5g/L,ZnSO4·7H2O 0.1~0.2g/L,FeSO4·7H2O 0.1~0.2g/L,MnSO4·7H2O 

0.01~0.05g/L,使用中性滤纸过滤后的海水配制,用2.0mol/L HCl水溶液调节pH值为3.0±0.1;

所述的种子液是将解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica CICC1675菌株经常压室温等离子体诱变后涂布于甘油高渗固体筛选培养基上培养,得到耐高渗解脂耶氏酵母菌株,再将所得菌株接入种子培养基培养后获得。

2.根据权利要求1所述的恒流弱电场胁迫下海水非灭菌高渗发酵甘油生产D‑阿拉伯糖醇的方法,其特征在于:控制发酵液电流强度为300mA。

3.根据权利要求1所述的恒流弱电场胁迫下海水非灭菌高渗发酵甘油生产D‑阿拉伯糖醇的方法,所述等离子体诱变的解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica CICC1675细胞浓度为

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10~10 个/mL,诱变条件为:载气为氦气,载气流量12.5L/min,13.56MHz电源控制系统,电源功率40W,辐射距离2mm,辐照时间150s。

4.根据权利要求1所述的恒流弱电场胁迫下海水非灭菌高渗发酵甘油生产D‑阿拉伯糖醇的方法,其特征在于所述甘油高渗固体筛选培养基为:甘油200~250g/L,酵母浸粉5~

20g/L,2,3,5‑三苯基氯化四氮唑0.05~0.2g/L,琼脂18~20g/L,使用中性滤纸过滤后的海水配制,pH 5.0~6.0,121℃灭菌20min。

5.根据权利要求1所述的恒流弱电场胁迫下海水非灭菌高渗发酵甘油生产D‑阿拉伯糖醇的方法,其特征在于所述种子培养基为:甘油30~80g/L,酵母浸粉5~20g/L,MgSO4·7H2O 

0.5~2.0g/L,KH2PO4 0.2~2.0g/L,使用中性滤纸过滤后的海水配制,pH 5.0~6.0,121℃灭菌20min。