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专利号: 2021108355670
申请人: 济南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种检测ATP、谷胱甘肽及Fpg糖基化酶的通用荧光生物传感器,其特征在于,包含ATP block链,GSH block链,Fpg block链,Apt1,Apt2,Cas12a蛋白,S链,FQ链、sgRNA;

所述的sgRNA序列为SEQ ID No:1;

所述的ATP block序列为SEQ ID No:2;

所述的GSH block序列为SEQ ID No:3;

所述的Fpg block序列为SEQ ID No:4;

所述的Apt1序列为SEQ ID No:5;

所述的Apt2序列为SEQ ID No:6;

所述的S序列为SEQ ID No:7;

所述的FQ序列为SEQ ID No:8;

所述的GSH block链的中间修饰有二硫键,Fpg block链的5’端的第八个碱基修饰有

8oxo‑G,FQ链的5’末端与3’末端分别修饰有荧光基团与淬灭基团。

2.根据权利要求1所述的检测ATP、谷胱甘肽及Fpg糖基化酶的通用荧光生物传感器,其特征在于,所述的ATP block与sgRNA的摩尔比为1:1。

3.根据权利要求1所述的检测ATP、谷胱甘肽及Fpg糖基化酶的通用荧光生物传感器,其特征在于,所述的GSH block与sgRNA的摩尔比为1:1。

4.根据权利要求1所述的检测ATP、谷胱甘肽及Fpg糖基化酶的通用荧光生物传感器,其特征在于,所述的Fpg block与sgRNA的摩尔比为1:1。

5.根据权利要求1所述的检测ATP、谷胱甘肽及Fpg糖基化酶的通用荧光生物传感器,其特征在于,所述的Apt1、Apt2、ATP block的摩尔比为1:1:1。

6.权利要求1所述的检测ATP、谷胱甘肽及Fpg糖基化酶的通用荧光生物传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将sgRNA分别与ATP block,GSH block,Fpg block退火,得到ATP Lock,GSH Lock,Fpg Lock;

(2)在步骤(1)得到的ATP Lock中加入Apt1,Apt2,Cas12a蛋白,S链,FQ链,ATP;37°C水浴锅中反应90min;65°C水浴锅中10min,终止反应;

(3)在步骤(1)得到的Fpg Lock中加入Cas12a蛋白,S链,FQ链,Fpg;37°C水浴锅中反应

90min;65°C水浴锅中10min,终止反应;

(4)在步骤(1)得到的GSH Lock中加入Cas12a蛋白,S链,FQ链,GSH;37°C水浴锅中反应

90min;65°C水浴锅中10min,终止反应。

7.权利要求1所述的检测ATP、谷胱甘肽及Fpg糖基化酶的通用荧光生物传感器在检测ATP、GSH、Fpg糖基化酶上的应用。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述应用的具体方法为:激发波长为

485nm,发射波长为520nm,电压为670V,通过荧光变化检测待测目标物。