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专利号: 2021108059107
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-27
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种蜡样芽孢杆菌的高密度培养方法,其特征在于,包括如下步骤:(a)将活化的蜡样芽胞杆菌接种于培养基中培养获得种子液;

(b)将步骤(a)中的种子液接种于发酵初始培养基中,当发酵至对数生长期时,每隔1.5~2.5h以脉冲方式补加进料培养基,当菌体达到稳定期时,停止补加进料培养基,当发酵至

25~35h,停止发酵;

步骤(b)中,所述进料培养基含有碳源、镁盐和氮源;

步骤(b)中,通过流加碱液维持pH在6~7;

步骤(b)中,搅拌转速为200~400rpm、通气量Gas Flo为2~5L/min。

2.根据权利要求1所述的一种蜡样芽孢杆菌的高密度培养方法,其特征在于,步骤(b)中,进料培养基还含有磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、氯化钠、氯化锰和/或氯化钙。

3.根据权利要求1所述的一种蜡样芽孢杆菌的高密度培养方法,其特征在于,步骤(b)中,进料培养基的补加量为50~70mL/次。

4.根据权利要求1所述的一种蜡样芽孢杆菌的高密度培养方法,其特征在于,步骤(b)中,温度为31~33℃。

5.根据权利要求1所述的一种蜡样芽孢杆菌的高密度培养方法,其特征在于,步骤(b)中,在蜡样芽胞杆菌对数生长期中期前保持转速为200~300rpm、通气量Gas Flo为2~3L/min,在对数生长期中期到稳定期前保持转速为300~400rpm、通气量Gas Flo为3~4L/min,在稳定期保持转速为200~300rpm、通气量Gas Flo为4~5L/min。

6.根据权利要求1所述的一种蜡样芽孢杆菌的高密度培养方法,其特征在于,所述碱液选自但不限于氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钾、氨水、碳酸钾和氢氧化钙。

7.根据权利要求6所述的一种蜡样芽孢杆菌的高密度培养方法,其特征在于,在菌体生长达到稳定期前流加氨水,在菌体生长达到稳定期后流加氢氧化钠。

8.根据权利要求7所述的一种蜡样芽孢杆菌的高密度培养方法,其特征在于,氢氧化钠浓度在1‑3mol/L,氨水的浓度在10‑50%。

9.根据权利要求2的一种蜡样芽孢杆菌的高密度培养方法,其特征在于,所述进料培养基按g/L计由以下成分组成:200~400的葡萄糖、25~75的酵母提取物、50~100的大豆蛋白胨、2~4的硫酸镁和1~3的磷酸二氢钾。

10.权利要求1~9所述一种蜡样芽孢杆菌的高密度培养方法在制备益生菌菌剂方面的应用。