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专利号: 2021107890841
申请人: 南京迈迪森亚生物科技有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2024-12-18
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法,其特征在于,步骤如下:

(1)、合成金属有机骨架Fe‑MIL‑88;

(2)、制备发夹探针H1,H2,H3,H4,H5,H6,H7,H8,H9:将H1‑H9于95℃反应,然后自然冷却至室温;

(3)、制备荧光探针:将步骤(2)所得的发夹探针与步骤(1)所得的Fe‑MIL‑88混合,发夹探针上标记的FAM(H1‑H3),TAMRA(H4‑H6),Cy5(H7‑H9)的荧光被猝灭,随着目标物的加入,

520nm处FAM的荧光随着目标物microRNA‑21浓度逐渐增加而逐渐增强,580nm处TAMRA的荧光随着目标物microRNA‑499浓度逐渐增加而逐渐增强,680nm处Cy5的荧光随着目标物microRNA‑133a浓度逐渐增加而逐渐增强;

(4)、根据荧光强度对相应目标物的浓度绘制标准曲线;

(5)、根据标准曲线,获得样品中microRNA‑21,microRNA‑499,microRNA‑133a的浓度,完成对3种microRNA的定量检测。

2.根据权利要求1所述的一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,金属有机骨架Fe‑MIL‑88的紫外吸收波长为

400‑800nm。

3.根据权利要求1所述的一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,发夹探针与Fe‑MIL‑88培育时间为0‑40min且大于0。

4.根据权利要求1所述的一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,目标物与发夹探针培育时间为0‑120min且大于0。

5.根据权利要求1所述的一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,Fe‑MIL‑88浓度为175‑525μg/mL。

6.根据权利要求1所述的一种同时定量检测血清中3种急性心肌梗死相关microRNA荧光探针的制备方法,其特征在于:步骤(4)中,根据520nm处荧光强度对microRNA‑21的浓度绘制标准曲线,根据580nm处荧光强度对microRNA‑499的浓度绘制标准曲线,根据680nm处荧光强度对microRNA‑133a的浓度绘制标准曲线。