1.一种阳离子型荧光加脂剂的制备方法,包括下述步骤:(1)首先使用脂肪酸与三乙醇胺在氮气保护下于120‑180℃反应3‑8h,得中间产物A;
(2)取中间产物A与酸酐反应得中间产物B,然后将B溶于二甲基甲酰胺或二甲亚砜并加入5‑氨基荧光素和1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐进行反应,制得产物C;
中间产物A与酸酐的摩尔比为1:1 1:2,反应温度为75 125℃,反应时间1.5 4.0h;
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中间产物B与二甲基甲酰胺或二甲亚砜的质量比为1:50 1:500;
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中间产物B与5‑氨基荧光素的摩尔比为1:1 1:2;
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中间产物B与1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐的质量比为1:0.05 1:5;
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(3)在反应产物C中加入二氯甲烷和水,充分混合均匀后静置分层,收集有机相;重复上述过程3 5次,最后将收集到的有机相在旋转蒸发仪上减压蒸馏除去二氯甲烷,得到中间产~物D;
(4)取中间产物D溶于无水乙醇,加入氯化苄,冷凝回流反应2‑8h,反应完成后减压旋蒸除去乙醇,得荧光标记物E;
(5)按质量比,取1份荧光标记物E加入5份 10份乙二醇单丁醚,混合均匀后将其一起加~入20份 200份商品阳离子加脂剂中,即得阳离子型荧光标记加脂剂。
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2.根据权利要求1所述的阳离子型荧光加脂剂的制备方法,其特征在于,步骤(1)的脂肪酸为月桂酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、花生四烯酸、芥酸中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的阳离子型荧光加脂剂的制备方法,其特征在于,步骤(1)的脂肪酸与三乙醇胺的摩尔比为1:1 2:1。
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4.根据权利要求1所述的阳离子型荧光加脂剂的制备方法,其特征在于,步骤(2)的酸酐为马来酸酐、丁二酸酐、衣康酸酐、己二酸酐、邻苯二甲酸酐中的一种或几种。
5.根据权利要求1所述的阳离子型荧光加脂剂的制备方法,其特征在于,步骤(2)中的中间产物B与5‑氨基荧光素及1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐的反应温度为
10 50℃,反应时间为0.5h 10h。
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6.根据权利要求1所述的阳离子型荧光加脂剂的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述的产物C与步骤(3)中二氯甲烷的体积比为1:1 1:20。
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7.根据权利要求1所述的阳离子型荧光加脂剂的制备方法,其特征在于,步骤(3)中的二氯甲烷与水的体积比为1:0.5‑1:5。
8.根据权利要求1所述的阳离子型荧光加脂剂的制备方法,其特征在于,步骤(4)中间产物D与无水乙醇的质量比为1:20 1:100,中间产物D与氯化苄的摩尔比为1:1。
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9.根据权利要求1所述的阳离子型荧光加脂剂的制备方法,其特征在于,步骤(4)中间产物D与氯化苄的反应温度为50‑80℃。