1.医用食品中海氏肠球菌的微滴数字PCR检测方法，包括以下步骤：

1）海氏肠球菌样品标准菌株使用MRS液体培养基，37  °C静置培养24 h得到海氏肠球菌纯培养液；其他非目标菌株使用LB液体培养基37 °C培养24 h；称取25g样品至有225 mL无菌水的无菌均质袋中，充分混匀后10倍梯度稀释；

2）分别取1 mL阳性对照、阴性对照、待测样品提取DNA；

3）获得鉴定海氏肠球菌的PCR扩增引物及探针；

4）将步骤2中所得DNA进行微滴式数字PCR扩增，反应体系为：不含dUTP 的2× ddPCR Supermix for Probes10 µL、10 µM的引物各0.4 µL、10 µM的探针0.4 µL、DNA模版1 µL，ddH2O补足至20 µL；充分混匀后轻微离心，20 µL混合液全量转移至Bio‑Rad DG8微滴生成卡中，去除其中气泡，添加70 µL微滴生成油，固定微滴生成卡衬垫后，放置于QX100 Droplet Generator仪器中生成油包水液滴；生成后微滴全量转移至96孔板中，封膜后使用普通PCR仪进行扩增反应；PCR反应程序为：95°C 10 min，1个循环；95 °C 30 s，56°C 30 s，

40个循环；98°C 10 min，1个循环；12 °C降温保存产物；

5）反应结束后使用QX100 Droplet Reader对步骤4）中反应液读取微滴数及荧光信号，并进行数据处理；

步骤3）中所述的鉴定海氏肠球菌的PCR扩增引物及探针，包括：海氏肠球菌引物正向序列：5'‑ccactcagcttgatgtaa‑3'；反向序列：5'‑gtttgttcaataatcttcagatc‑3'；探针：5'‑6‑FAM‑acaacagcaccacgacgat‑TAMRA‑3'。