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专利号: 202110175379X
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种植物根系分泌物的分离收集方法,其特征在于,包括分离收集装置,所述分离收集装置包括:

下瓶体,所述下瓶体设有瓶口;

无底的上瓶体,所述上瓶体设有瓶口,所述上瓶体的底部设有隔板,所述隔板上设有若干通孔,所述隔板的上表面覆盖有膜层,所述上瓶体和所述下瓶体能够上下对接连通装配;

瓶盖,可盖装在所述上瓶体的瓶口上;

基于所述分离收集装置包括如下步骤:S100、分离收集装置组装灭菌:将所述分离收集装置组装好后,对所述分离收集装置进行灭菌处理,灭菌完成后,立即完全拧紧所述瓶盖,避免细菌进入所述分离收集装置;

S200、配置固体培养基b:按不同培养基营养成分配置液状培养基a,并向所述液状培养基a中加入凝固剂,并灭菌,之后将所述液状培养基a转移至所述上瓶体中,并盖上所述瓶盖,待所述液状培养基a凝固,获得偏软的固体培养基b,取下所述下瓶体,用针状物穿过所述隔板的通孔在所述膜层上扎密集的小孔,再重新装上所述下瓶体;

S300、植物接种:将无菌植物接种到所述固体培养基b中,并培养;

S400、收集植物根系分泌物:无菌植物培养成型后,定期由所述上瓶体的瓶口加入所述液状培养基a,所述液状培养基a依次流经所述固体培养基b、膜层和隔板后滴入所述下瓶体中,获得植物根系分泌物。

2.根据权利要求1所述的植物根系分泌物的分离收集方法,其特征在于:所述上瓶体和所述下瓶体的装配端设有对应的螺纹连接部。

3.根据权利要求1所述的植物根系分泌物的分离收集方法,其特征在于:所述膜层为玻璃纸。

4.根据权利要求1所述的植物根系分泌物的分离收集方法,其特征在于:所述隔板上的通孔均匀布置。

5.根据权利要求1所述的植物根系分泌物的分离收集方法,其特征在于:步骤S100中,采用121℃普通高压灭菌锅灭菌20min,灭菌时,所述瓶盖不用拧紧,使得瓶内与外界连通。

6.根据权利要求1所述的植物根系分泌物的分离收集方法,其特征在于:步骤S200中,加入的所述凝固剂量为使得所述液状培养基a充分凝固的70%‑90%。

7.根据权利要求6所述的植物根系分泌物的分离收集方法,其特征在于:所述步骤S200中,加入的所述凝固剂量为使得所述液状培养基a充分凝固的80%。

8.根据权利要求1所述的植物根系分泌物的分离收集方法,其特征在于:所述步骤S200中,对所述液状培养基a采用121℃普通高压灭菌锅灭菌20min,随后取出所述液状培养基a冷却至65‑75℃,之后将所述液状培养基a转移至所述上瓶体中。

9.根据权利要求1所述的植物根系分泌物的分离收集方法,其特征在于:步骤S200中,由所述上瓶体的瓶口加入所述液状培养基a的间隔周期为两天以上,每次加入量为瓶内所述固体培养基b体积的25%。