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专利号: 2020116305700
申请人: 山西大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-15
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种黄花菜抗肿瘤活性蛋白,其特征在于,通过包括如下步骤的方法制得:步骤1,取干黄花菜,剪碎后,加入蛋白提取液,4℃下浸泡并搅拌过夜,离心30min后取上清液,即为黄花菜蛋白粗提液;

步骤2,在黄花菜蛋白粗提取液中边搅拌边加入5倍体积的‑20℃预冷的丙酮,‑20℃沉淀蛋白1‑2小时,4℃离心30min,收集沉淀,用丙酮清洗沉淀2‑3次,沉淀风干,得到黄花菜粗蛋白;

步骤3,将黄花菜粗蛋白用pH 7.4的Tris‑Hcl缓冲液在冰上溶解,离心30min后取上清液,按0℃下的硫酸铵溶液饱和度计算表,加入60%饱和度的硫酸铵粉末,充分搅拌溶解后,静置40min,离心30分钟收集沉淀,沉淀用pH 7.4的Tris‑Hcl缓冲液溶解,离心,收集上清,然后将其装入透析袋中,透析24小时,浓缩后冷冻干燥,即得到黄花菜抗肿瘤粗蛋白;

步骤4,将上述黄花菜抗肿瘤粗蛋白溶解于Tris‑Hcl缓冲液中,离心后取上清液,加入到SP阳离子交换层析柱,用pH 7.4的Tris‑Hcl缓冲液洗柱子,再用0.02mol/L和0.04mol/L的Nacl溶液洗脱后,收集洗脱液;

步骤5,将上述洗脱液再一次过SP阳离子交换层析柱,用pH 7.4的Tris‑Hcl缓冲液洗柱子,再用0.02mol/L和0.04mol/L的Nacl溶液洗脱后,收集洗脱液,然后浓缩,即为黄花菜抗肿瘤活性蛋白。

2.根据权利要求1所述的一种黄花菜抗肿瘤活性蛋白,其特征在于:所述步骤1中黄花菜和蛋白提取液的质量比为1:3‑6,所述蛋白提取液为pH7.4的磷酸缓冲液。

3.根据权利要求1所述的一种黄花菜抗肿瘤活性蛋白,其特征在于:所述步骤1中黄花菜和蛋白提取液的质量比为1:5。

4.根据权利要求1所述的一种黄花菜抗肿瘤活性蛋白,其特征在于:所述步骤1、3、4、5均在0‑4℃条件下进行。

5.一种权利要求1所述的黄花菜抗肿瘤活性蛋白在制备抗肿瘤药物中的应用。