1.一种具有抗肝癌细胞增殖活性的小球藻多糖的提纯方法，其特征在于，包括：通过离子交换层析法和苯酚-硫酸比色法联用，对小球藻粗多糖PCA分离得到PCA1、PCA2以及PCA3粗多糖提取物；

通过分子排阻层析法和苯酚-硫酸比色法联用，对所述提取物净化，得到精PCA1与精PCA2；

通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法，检测精PCA1与精PCA2对SMMC-7721的抗增殖作用；

通过氯化钡-浊度法检测精PCA1与精PCA2。

2.根据权利要求1所述的一种具有抗肝癌细胞增殖活性的小球藻多糖的提纯方法，其特征在于，通过离子交换层析法和苯酚-硫酸比色法联用，对小球藻粗多糖(PCA)分离得到PCA1、PCA2以及PCA3粗多糖提取物的步骤包括：将DEAE-琼脂糖凝胶产品进行溶胀预处理，真空脱气后装柱，柱长7cm，直径3cm；用

300mL，pH＝7.2的Tris-HCl缓冲液300mL平衡；

将浓度为5mg/mL离心后的粗多糖溶液3mL加入平衡好的柱内，打开柱出口，粗多糖溶液开始缓慢渗入凝胶柱中，待完全渗入后加洗脱液洗脱，采用溶于Tris-HCl缓冲液的NaCl溶液浓度梯度洗脱，流速为100mL/h；

每10mL收集一分样，各分样用苯酚-硫酸比色法测吸光值，绘制吸光值—洗脱体积的洗脱曲线；

将剩余多糖重复分离纯化，合并洗脱曲线中峰对应的分样，将剩余多糖继续处理，并将每个峰的所有样品结合起来；

得到粗PCA1、PCA2与PCA3提取物，于-35℃，24h冻干备用。

3.根据权利要求1所述的一种具有抗肝癌细胞增殖活性的小球藻多糖的提纯方法，其特征在于，通过分子排阻层析法和苯酚-硫酸比色法联用，对所述提取物净化，得到精PCA1与精PCA2的步骤包括：

将葡聚糖G-25凝胶颗粒经溶胀处理后装柱，柱长40cm，直径1.0cm；

将葡萄糖标准品及所述粗多糖提取物分别溶解于蒸馏水中，充分搅拌使其溶解，离心取上清液，将上清液加入凝胶柱内，打开柱出口，待样品溶液完全渗入凝胶后，加入洗脱液开始洗脱；

每1mL收集一分样，用苯酚—硫酸法测定各分样的吸光值，绘制吸光值—洗脱体积的洗脱曲线，合并洗脱曲线中峰对应的分样；

将洗脱后的产物于-35℃，24h冻干备用。

4.根据权利要求1所述的一种具有抗肝癌细胞增殖活性的小球藻多糖的提纯方法，其特征在于，通过四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法，检测精PCA1与精PCA2对SMMC-7721的抗增殖作用的步骤包括：

用0.25％的胰蛋白酶消化SMMC-7721细胞，然后用RPMI-1640培养基悬浮，添加10％的小牛血清，得到反应液；

将所述反应液在37℃在96孔平板引导微板中与5％CO2培养箱中孵育；

培养24h后，去除原代营养液，分别加入含精PCA1或PCA2的培养基，最终浓度为1g/L，培养24h；

每孔加入20μL四甲基偶氮唑盐溶液，继续培养4h；

复孔平行，取不同批次获取的精PCA1与PCA2，平行实验三次，取平均值；

计算抑制率，公式如下：抑制率＝1-(实验孔OD值-空白孔OD值)/(对照孔A值-空白孔OD值)×100％。

5.根据权利要求1所述的一种具有抗肝癌细胞增殖活性的小球藻多糖的提纯方法，其特征在于，通过氯化钡-浊度法检测精PCA1与精PCA2的步骤包括：称量1mg PCA1或PCA2，溶解在1mL盐酸中，密封100℃水浴7h并冷却后，进行冷冻干燥得到冻干粉末；用1mL蒸馏水溶解冻干粉末得到溶液，然后溶液稀释成2mL得到稀释液；

配制BaCl2明胶溶液、三氯乙酸水溶液以及标准液；

稀释液中加入8％三氯乙酸水溶液和0.5％BaCl2明胶溶液，混合后室温下静置15min；

于360nm处测量吸光度值，以10μg/mL硫酸钾水溶液绘制标准曲线并计算得到硫酸盐浓度。

6.根据权利要求1所述的一种具有抗肝癌细胞增殖活性的小球藻多糖的提纯方法，其特征在于，所述小球藻粗多糖是从自养小球藻通过超声破碎和碱萃取法制备得来；其中，自养小球藻煮过三次后在12小时黑暗以及12小时光循环中生长。

7.根据权利要求6所述的一种具有抗肝癌细胞增殖活性的小球藻多糖的提纯方法，其特征在于，所述自养小球藻中干物质组分：蛋白质为55～67％；粗纤维为1～4％；脂质为8～

13％；灰分为5～8％；糖类为10～20％；水分为3～5％；小球藻多糖中含有以下几种已知糖基与示活的单糖；已知糖基的摩尔比如下：D-岩藻糖：D-鼠李糖：D-2-氨基葡萄糖：D-半乳糖：D-葡萄糖＝1.3：1.0：1.4：1.2：3.1。