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专利号: 2020108982367
申请人: 燕山大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种荧光传感器的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:①设计单链DNA:ssDNA1在链结构中四个碱基的磷酸骨架中的P=O键依次修饰为P=S键;ssDNA2为能够特异性识别甲胎蛋白的适配体,ssDNA2不做修饰;ssDNA3与ssDNA1碱基完全互补、与ssDNA2部分碱基互补,ssDNA3不做修饰;

②制备DNA功能化CdTe量子点:调节氯化镉和三巯基丙酸的混合溶液的pH值至10.0,依次加入硼氢化钠、亚碲酸钠和巯基修饰的ssDNA1后加热至95℃,保持温度不变,反应1个小时,得到DNA‑QDs溶液,经无水乙醇洗涤、离心后加入PBS缓冲液溶解,利用荧光分光光度计观察其荧光情况;

③制备低浓度的氧化石墨烯溶液:将氧化石墨烯粉末加入纯净水,保持一定温度超声使之溶解,得到高浓度的氧化石墨烯溶液,然后再加入一定量的纯净水进行稀释,得到低浓度的氧化石墨烯溶液;

④将Tris‑HCl缓冲液加入至步骤②制得的DNA功能化CdTe量子点和步骤③制得的低浓度的氧化石墨烯溶液的混合液中,利用荧光分光光度计观察其荧光情况;

⑤制备发夹溶液:将ssDNA2和ssDNA3按一定体积比混合,并加入一定量的Tris‑HCl缓冲液,充分摇匀后加热到95℃,持续加热五分钟,再在室温下逐渐冷却两个小时;

⑥制备荧光传感器并检测甲胎蛋白溶液:将步骤④制得的溶液、步骤⑤制得的发夹溶液按一定体积比混合后,加入一定浓度的甲胎蛋白溶液,利用荧光分光光度计观察其荧光情况。

2.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法,其特征在于:所述步骤②中氯化镉中的镉元素、三巯基丙酸和亚碲酸钠中的碲元素的摩尔量之比为8:1:1,所述硼氢化钠与亚碲酸钠物质的量之比大于10:1。

3.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法,其特征在于:所述步骤②中DNA‑QDs溶液物质的量浓度为0.01‑0.03μM。

4.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法,其特征在于:所述步骤③中制得的低浓度氧化石墨烯溶液中氧化石墨烯质量浓度范围为50‑100μg/mL。

5.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法,其特征在于:所述步骤④中DNA功能化CdTe量子点、低浓度的氧化石墨烯溶液和Tris‑HCl缓冲液的体积比为1:1:3。

6.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法,其特征在于:所述步骤⑤中ssDNA2、ss DNA3和Tris‑HCl缓冲液的体积比为1:1:8。

7.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法,其特征在于:所述步骤⑥中步骤④制得的溶液、步骤⑤制得的发夹溶液和甲胎蛋白溶液混合的体积比为5:1:1。

8.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法,其特征在于:所述Tris‑HCl缓冲液包括Tris溶液、NaCl溶液和MgCl2溶液且Tris‑HCl缓冲液的PH=7.4,所述Tris溶液浓度为0.1M,所述NaCl溶液取值范围为50‑100mM,所述MgCl2溶液取值范围为2.5‑10mM。

9.根据权利要求1所述的一种荧光传感器的制备方法,其特征在于:所述ssDNA1溶液、ssDNA2溶液的ssDNA3溶液的浓度均相同。