利索能及
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专利号: 2020104079696
申请人: 湖南师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种雌核发育青鱼的培育方法,其特征在于,包括以下步骤:首先挑选性成熟雄性锦鲤和雌性青鱼进行人工催产,然后将经过紫外灭活的锦鲤精子和青鱼的成熟卵子混合,激活卵子,将被激活的卵子置于0 4℃温度条件下冷休克处理12 15min,然后依次置于8 10~ ~ ~

℃、16 18℃水中各处理1 2min,再将其置于水温为25 28℃的孵化槽中孵化,经鉴定筛选后~ ~ ~

即得到二倍体雌核发育青鱼;

所述雌性青鱼的人工催产具体包括如下步骤:采用二次注射法对雌性青鱼进行人工催产,第一次注射每尾按照5µg/kg的剂量注射黄体素释放激素类似物,10 12h后进行第二次~

注射,每尾再注射10 12µg/kg黄体素释放激素类似物和5 10mg地欧酮;所述雌性青鱼进行~ ~

第二次注射时,采用一次注射法对雄性青鱼进行人工催产,每尾按照5‑6µg/kg的剂量注射黄体素释放激素类似物;两次注射完毕后按1∶1的数量比将雌、雄青鱼放入同一产卵池中,直至催产完成;对于青鱼,在催产前10 15天,每尾按照0.1 0.2µg/kg的剂量注射黄体素释~ ~

放激素类似物进行催熟;

所述雄性锦鲤的人工催产具体包括如下步骤:采用一次注射法对所述雄性锦鲤进行人工催产,每尾注射400‑500IU/Kg绒毛膜促性腺激素和10‑15µg/kg黄体素释放激素类似物;

所述紫外灭活的锦鲤精子由以下方法得到:轻压雄性锦鲤腹部将精子从泄殖腔中挤出,用干燥洁净的容器接取后迅速用4℃预冷的Hank’s液按1:4 6的体积比稀释,然后以薄~

层形式平铺在4℃预冷的培养皿中,将培养皿置于垫有冰板的摇床上,并用紫外灯照射,直至得到紫外灭活的锦鲤精子;所述紫外灯照射的具体操作包括如下步骤:用2支15W的紫外灯在距离10 12cm处进行照射处理,在照射15min后,每隔1 2min沾取精液涂于载玻片上,用~ ~

水激活,于显微镜下镜检判断其活性,当90%数量的精子游动能力明显减弱时停止照射,得到紫外灭活的锦鲤精子。

2.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于,进行人工催产时维持池塘水温在22~

28℃。

3.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于,所述卵子的激活时间为2 3min。

~

4.根据权利要求1所述的培育方法,其特征在于,所述孵化槽中孵化出的鱼苗转入池塘中进行养殖,然后采用流式细胞DNA含量检测法和外周血细胞染色体检测法进行鉴定筛选。