1.一种温敏性细胞培养板,其特征在于:以经过修饰的硅片作为基底,硅片表面连有含叠氮端基侧链的温敏性聚合物刷p(EO)4MA,胆碱磷酸通过点击反应修饰于p(EO)4MA侧链末端;其中,p(EO)4MA以(EO)4MA为单体聚合得到;所述的硅片表面首先经过(11‑(2‑溴‑2‑甲基)丙酰氧基)十二烷基三氯硅烷的修饰,(11‑(2‑溴‑2‑甲基)丙酰氧基)十二烷基三氯硅烷为ATRP反应的引发剂,引发(EO)4MA的聚合;所述的(EO)4MA的结构式为
2.一种温敏性细胞培养板的制备方法,其特征在于:包含如下步骤:
a.制备(EO)4MA;首先进行第一次反应,向干燥的单口烧瓶中依次加入四甘醇、三乙胺和四氢呋喃,随后将对甲苯磺酰氯溶于四氢呋喃并滴加到反应体系中,室温反应后,除去生成的沉淀,并用二氯甲烷作为萃取剂进行萃取,旋转蒸发除去二氯甲烷后向溶液中加入叠氮化钠和二甲基甲酰胺,在反应后,除去沉淀、进行二氯甲烷萃取、MgSO4干燥,得到2‑(2‑(2‑(2‑叠氮乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醇,再进行第二次反应,向烧瓶中依次加入2‑(2‑(2‑(2‑叠氮乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醇、四氢呋喃、三乙胺,再将甲基丙烯酰氯滴加到反应体系中,室温反应后,除去沉淀、二氯甲烷萃取、MgSO4干燥,得到(EO)4MA;
b.制备温敏性聚合物刷p(EO)4MA表面;将经过(11‑(2‑溴‑2‑甲基)丙酰氧基)十二烷基三氯硅烷修饰过的硅片置于无水乙醇中,并将(EO)4MA、1,1,4,7,10,10‑六甲基三乙烯四胺、CuBr溶于乙醇中,在无氧环境中反应之后取出硅片,用无水甲苯和无水甲醇冲洗硅片表面,得到温敏性聚合物刷p(EO)4MA表面;
c.制备胆碱磷酸修饰的温敏性细胞培养板;用甲醇的水溶液溶解胆碱磷酸、五水硫酸铜以及抗坏血酸钠盐,得到混合溶液,随后将步骤b中得到的温敏性聚合物刷p(EO)4MA表面浸入上述混合溶液中反应,移除反应液,用甲醇冲洗表面,得到胆碱磷酸修饰的温敏性细胞培养板。
3.如权利要求2所述的一种温敏性细胞培养板的制备方法,其特征在于:步骤a的第一次反应中,向干燥的单口烧瓶中依次加入1.0mol四甘醇、0.25mol‑0.35mol三乙胺和50ml四氢呋喃,随后将0.2mol‑0.5mol对甲苯磺酰氯溶于50ml四氢呋喃并滴加到反应体系中,室温反应12h;后续过程中,在旋转蒸发除去二氯甲烷后向溶液中加入0.25mol‑0.28mol叠氮化钠和120ml二甲基甲酰胺,在70℃‑80℃范围内反应24h;步骤a的第二次反应中,甲基丙烯酰氯滴加到反应体系后,室温反应12h;
步骤b中,将经过(11‑(2‑溴‑2‑甲基)丙酰氧基)十二烷基三氯硅烷修饰过的硅片置于
10ml‑15ml无水乙醇中,并将1.74mmol‑3.48mmol(EO)4MA、0.028mmol‑0.042mmol的1,1,4,
7,10,10‑六甲基三乙烯四胺、0.014mmol‑0.029mmol的CuBr溶于乙醇中,在无氧环境中保持
45℃‑50℃的温度反应2h‑22h;
步骤c中,用10ml‑15ml甲醇的水溶液溶解50mg‑300mg胆碱磷酸、2mg‑6mg五水硫酸铜以及5mg‑15mg抗坏血酸钠盐,得到混合溶液,随后,将p(EO)4MA表面浸入上述混合溶液中,在
40℃下反应24h。
4.如权利要求3所述的一种温敏性细胞培养板的制备方法,其特征在于:制备(EO)4MA的第二次反应中,按摩尔比,2‑(2‑(2‑(2‑叠氮乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙醇∶三乙胺∶甲基丙烯酰氯=1∶(1.5‑3)∶1.2。
5.如权利要求3所述的一种温敏性细胞培养板的制备方法,其特征在于:步骤a中的对甲苯磺酰氯的滴加时间为2h‑3h,在滴加过程中使用冰浴,滴加结束后,撤去冰浴,在常温下反应。
6.如权利要求3所述的一种温敏性细胞培养板的制备方法,其特征在于:步骤a中甲基丙烯酰氯滴加时间为2h‑3h,在滴加过程中使用冰浴,滴加结束后,撤去冰浴,在常温下反应。
7.如权利要求3所述的一种温敏性细胞培养板的制备方法,其特征在于:步骤c中的甲醇水溶液中,甲醇与水的体积比为(4‑5)∶1。