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专利号: 2020102195230
申请人: 河海大学常州校区
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-10-22
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种局部交联密度可调控非匀质3D凝胶的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤S1. 将凝胶主干大分子溶液与粘附肽链混合,孵育得到接枝肽链的凝胶主干大分子溶液,将接枝肽链的凝胶主干大分子溶液分成N部分,得到N份第一产物,分别为第一产物

11、第一产物12、…、第一产物1N,对应的各第一产物的体积为V11、V12、…、V1N;N为大于或等于2的正整数;

步骤S2. 分别在步骤S1的N份第一产物中加入不同物质的量的硫代甘油分子溶液,得到N份第二产物,分别是第二产物21、第二产物22、…、第二产物2N,对应的各第二产物的体积为V21、V22、…、V2N;

步骤S3. 将步骤S2得到的N份第二产物在室温下孵育5-10分钟,然后再混合在一起,得到混合物三;

步骤S4. 将细胞悬液加入混合物三中,搅拌均匀,得到包含细胞的前体溶液;

步骤S5. 在容器内底面添加交联分子溶液,然后将步骤S4中包含细胞的前体溶液加入容器与交联分子溶液混合,即得到交联密度非均匀且粘附肽链非均匀的凝胶。

2.根据权利要求1所述的一种局部交联密度可调控非匀质3D凝胶的制备方法,其特征在于:所述步骤S1中的粘附肽链在最终凝胶内的浓度在5μM-600μM之间。

3.根据权利要求1所述的一种局部交联密度可调控非匀质3D凝胶的制备方法,其特征在于:所述步骤S1中凝胶主干大分子溶液的制备步骤如下:步骤S11. 取出于-80℃温度条件冷冻的无菌蒸馏水和缓冲液,在室温下融解为液态,得到液态蒸馏水和液态缓冲液;

步骤S12. 取出于-80℃温度条件冷冻而呈固态的马来酰亚胺-葡萄糖聚合物并加入蒸馏水进行溶解,溶解时通过漩涡振荡器进行振荡,得到马来酰亚胺-葡萄糖聚合物溶液;

步骤S13. 将所述步骤S11中的得到的液态无菌蒸馏水和液态缓冲液与所述步骤S12得到的马来酰亚胺-葡萄糖聚合物溶液于离心管中混匀,得到凝胶主干大分子溶液。

4.根据权利要求3所述的一种局部交联密度可调控非匀质3D凝胶的制备方法,其特征在于:所述缓冲液中含有HEPES缓冲液和磷酸盐缓冲液。

5.根据权利要求1所述的一种局部交联密度可调控非匀质3D凝胶的制备方法,其特征在于:所述步骤S2的具体过程如下:步骤S21. 取出于-80℃温度条件冷冻的硫代甘油加蒸馏水进行溶解,溶解时通过漩涡振荡器进行振荡,得到位点封闭分子溶液;

步骤S22. 在所述步骤S1中的N份第一产物中分别添加步骤S21中得到的硫代甘油分子溶液,吹打混匀后,室温静置时间T0,得到N份第二产物。

6.根据权利要求5所述的一种局部交联密度可调控非匀质3D凝胶的制备方法,其特征在于:所述时间T0为4-15 min。

7.根据权利要求1所述的一种局部交联密度可调控非匀质3D凝胶的制备方法,其特征在于:所述步骤S2中得到的N份第二产物的空置交联位点数目各不相同。

8.根据权利要求1所述的一种局部交联密度可调控非匀质3D凝胶的制备方法,其特征在于:当步骤S1中各第一产物的体积VA1、VA2、…、VAN全部相等时,步骤S2中的各第二产物的的体积VB1、VB2、…、VBN中至少存在两个彼此互不相等的值。

9.一种局部交联密度可调控非匀质3D凝胶,其特征在于:利用权利要求1-8任一项所述制备方法制得。

10.基于权利要求9所述的一种局部交联密度可调控非匀质3D凝胶的应用方法,其特征在于:包括如下过程:在培养板上采用新鲜培养基覆盖所述3D凝胶,然后将培养板移至培养箱用于组织培养;培养过程中每2天更换一次培养基。