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专利号: 2020102120200
申请人: 海南主健细胞分子遗传医学检验中心有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-19
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测叶酸代谢通路相关基因的试剂盒,其特征在于:包括用于检测与叶酸代谢通路相关的MTR基因RS1805087位点、CBS基因RS5742905位点、MTRR基因RS1801394位点、MTHFR 基因rs1801131位点和MTHFR 基因RS1801133位点的引物组合物,所述引物组合物的序列为:

MTR基因RS1805087位点的正反向PCR引物:SEQ ID No: 1‑2,正向延伸引物:SEQ ID No:11;

CBS基因RS5742905位点的正反向PCR引物:SEQ ID No: 3‑4,正向延伸引物:SEQ ID No:12;

MTRR基因RS1801394位点的正反向PCR引物:SEQ ID No: 5‑6,正向延伸引物:SEQ ID No:13;

MTHFR 基因RS1801131位点的正反向PCR引物:SEQ ID No:7‑8,正向延伸引物:SEQ ID No:14;

MTHFR 基因RS1801133位点的正反向PCR引物:SEQ ID No: 9‑10,正向延伸引物:SEQ ID No:15;

正向延伸引物序列中的5’端采用不同数量的ploy T修饰;其中,MTR基因RS1805087位点的正向延伸引物上的ploy T修饰数量11;CBS基因RS5742905位点的正向延伸引物上的ploy T修饰数量19;MTRR基因RS1801394位点的正向延伸引物上的ploy T修饰数量为32;

MTHFR 基因RS1801131位点的正向延伸引物上的ploy T修饰数量为14;MTHFR 基因RS1801133位点的正向延伸引物上的ploy T修饰数量为26;

所述MTR基因RS1805087位点、CBS基因RS5742905位点、MTRR基因RS1801394位点、MTHFR 基因RS1801131位点和MTHFR 基因RS1801133位点的正向延伸引物浓度比为1:2:3:2:3;

所述MTR基因RS1805087位点、CBS基因RS5742905位点、MTRR基因RS1801394位点、MTHFR 基因RS1801131位点和MTHFR 基因RS1801133位点的各对正反向PCR引物浓度比为1:2:1:1:

1。

2.如权利要求1所述的一种检测叶酸代谢通路相关基因的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括以下试剂:

(1)多重PCR扩增试剂:包括dNTPs、TaqDNA 聚合酶、PCR反应缓冲液、1x GC‑I 缓冲液、

2+

Mg :

(2)PCR产物纯化试剂:AP酶、Exol1酶、Seq buffer;(3)多重单碱基延伸反应试剂:SNaPshot Multiplex Kit ABI;

(4)延伸产物纯化试剂:SAP酶;

(5)测序变性反应试剂:120 LizSIZE STANDARD内标、Hi‑Di甲酰胺。

3.如权利要求2所述的一种检测叶酸代谢通路相关基因的试剂盒,其特征在于:纯化后多重PCR产物、正向延伸引物组合物与多重单碱基延伸反应试剂中的SNaPshot Multiplex KitABI的体积比为2:1:5。

4.如权利要求2所述的一种检测叶酸代谢通路相关基因的试剂盒,其特征在于:纯化后的延伸产物与测序变性反应试剂中的120 Liz SIZE STANDARD内标、Hi‑Di甲酰胺的体积比为1:1:18。