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专利号: 2020101919451
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-07-29
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种生物酶法去消旋化制备L-草铵膦的方法,以D,L-草铵膦为原料,经多酶催化体系催化获得L-草铵膦,其特征在于,所述酶催化体系包括用于将D,L-草铵膦中的D-草铵膦催化为2-羰基-4-[羟基(甲基)膦酰基]丁酸的D-氨基酸氧化酶、以及用于将2-羰基-4-[羟基(甲基)膦酰基]丁酸催化还原为L-草铵膦的草铵膦脱氢酶突变体,所述草铵膦脱氢酶突变体由野生菌Thiopseudomonas denitrificans中的草铵膦脱氢酶突变所得,突变位点为:V377S。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述D-氨基酸氧化酶的氨基酸序列如SEQ ID No.9所示。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述酶催化体系还包括用于去除副产物过氧化氢的过氧化氢酶。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述酶催化体系还包括辅酶循环系统,所述辅酶循环系统为以下至少一种:(1)甲酸脱氢酶辅酶循环系统:包括甲酸脱氢酶,甲酸盐和辅酶;

(2)葡萄糖脱氢酶辅酶循环系统:包括葡萄糖脱氢酶,葡萄糖和辅酶;

(3)乙醇脱氢酶辅酶循环系统:包括乙醇脱氢酶,异丙醇和辅酶。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述甲酸脱氢酶氨基酸序列如SEQ ID No.13所示;所述葡萄糖脱氢酶氨基酸序列如SEQ ID No.11所示;所述乙醇脱氢酶氨基酸序列如SEQ ID No.15所示。

6.一种草铵膦脱氢酶突变体,其特征在于,由野生菌Thiopseudomonas denitrificans中的草铵膦脱氢酶突变所得,突变位点为:V377S。

7.编码如权利要求6所述草铵膦脱氢酶突变体的基因,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

8.包含如权利要求7所述基因的基因工程菌。

9.如权利要求6所述草铵膦脱氢酶突变体、如权利要求7所述基因或如权利要求8所述基因工程菌在制备L-草铵膦中的应用。