利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2020101493139
申请人: 常州大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-22
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种检测莱克多巴胺的电化学发光适配体传感器,其特征在于,所述电化学发光适配体传感器是由适配体负载于由纳米复合材料HKUST‑1/PTC‑PEI修饰玻碳电极的表面而成;

所述纳米复合材料HKUST‑1/PTC‑PEI修饰玻碳电极的制备方法如下:

S1. PTC‑PEI的制备:将PTCDA溶解在氢氧化钠的水溶液中,然后向其中加入HCl,得到红色沉淀物,将红色沉淀物用去离子水洗涤以除去过量的反应物质,得到PTCA溶液,向PTCA溶液中依次加入EDC、NHS,搅拌,并加入聚乙烯亚胺,继续搅拌,然后用盐酸调pH值,通过离心、干燥,制得红色粉末状产物PTC‑PEI;将PTC‑PEI分散于超纯水中,使其分散均匀,得到PTC‑PEI的水分散液;

S2. HKUST‑1的制备:将三水合硝酸铜和均苯三甲酸,溶解于二甲基亚砜中并超声波处理,然后将其注入到含有聚乙烯吡咯烷酮的甲醇中,同时搅拌;然后经离心,洗涤,干燥得到HKUST‑1的蓝色纳米晶体;将HKUST‑1分散于N,N‑二甲基甲酰胺里,并加入N‑(3‑二甲基氨基丙基)‑N'‑乙基碳二亚胺盐酸盐和N‑羟基琥珀酰亚胺,超声使其分散均匀,得到HKUST‑1的DMF分散液;

S3.将玻碳电极抛光,依次用硝酸溶液、乙醇溶液和超纯水超声清洗,室温下吹干,获得前处理后的玻碳电极待用;依次移取步骤S1中的PTC‑PEI的水分散液和步骤S2中的HKUST‑1的DMF分散液并将其滴涂在经前处理后的玻碳电极表面,自然晾干,得到所述纳米复合材料HKUST‑1/PTC‑PEI修饰的玻碳电极。

2.根据权利要求1所述的一种检测莱克多巴胺的电化学发光适配体传感器,其特征在于,所述适配体是由含有5'‑NH2‑AAAAGTGCGGGCAAA‑3' 碱基序列的适配体。

3.根据权利要求1所述的一种检测莱克多巴胺的电化学发光适配体传感器,其特征在于,所述步骤S1中所得PTC‑PEI的水分散液的浓度为0.5 mg/mL。

4.根据权利要求1所述的一种检测莱克多巴胺的电化学发光适配体传感器,其特征在于,所述步骤S2所得HKUST‑1的DMF分散液的浓度为1 mg/mL。

5.根据权利要求1 4任意一项所述的一种检测莱克多巴胺的电化学发光适配体传感器~

的制备方法,其特征在于,通过酰胺键结合作用将适配体负载在所述纳米复合材料HKUST‑

1/PTC‑PEI修饰的玻碳电极表面,自然晾干,制得所述电化学发光适配体传感器。

6.根据权利要求5所述的一种检测莱克多巴胺的电化学发光适配体传感器的制备方法,其特征在于,将适配体负载在纳米复合材料HKUST‑1/PTC‑PEI修饰的玻碳电极表面的具体方法为:首先向含有KCl、NaCl、MgCl2和乙二胺四乙酸的Tris‑HCl缓冲溶液中加入所述适配体,配制适配体浓度为1 6 μmol/L的适配体溶液,然后移取所述适配体溶液并将其滴涂~在所述纳米复合材料HKUST‑1/PTC‑PEI修饰的玻碳电极表面。

7.根据权利要求6所述的一种检测莱克多巴胺的电化学发光适配体传感器的制备方法,其特征在于,所述适配体溶液中适配体的浓度为5 μmol/L。

8.根据权利要求1 4任意一项所述的一种检测莱克多巴胺的电化学发光适配体传感器~

的应用方法,其特征在于,以电化学发光适配体传感器作为工作电极,Ag/AgCl为参比电极,铂丝电极为对电极组成三电极体系,样品中的莱克多巴胺被定量捕捉到传感器的表面,通过产生的发光信号实现莱克多巴胺的检测。

9.根据权利要求8所述的一种检测莱克多巴胺的电化学发光适配体传感器的应用方法,其特征在于,具体步骤为:A1.含K2S2O8的PBS缓冲溶液的配制:用pH为 7.4的0.1 mol/L的 PBS缓冲溶液配制含

0.05 mol/L K2S2O8的PBS缓冲溶液;

‑5

A2.不同浓度的莱克多巴胺标准溶液的配制:首先配制50×10 mol/L的莱克多巴胺溶‑5  ‑5 液,用甲醇溶解,然后用水稀释得到1×10 mol/L的莱克多巴胺溶液,然后将1×10 mol/L的莱克多巴胺溶液用甲醇水溶液进行稀释,得到若干不同浓度的莱克多巴胺标准溶液,莱‑12 ‑6 克多巴胺标准溶液的浓度范围为1.0×10 ~1.0×10 mol/L;

A3.标准曲线的绘制:将所述电化学发光适配体传感器置于步骤A2配制的不同浓度的莱克多巴胺标准溶液中浸泡相同时间,使电化学发光适配体传感器结合莱克多巴胺,然后取出并淋洗,作为工作电极,Ag/AgCl为参比电极,铂电极为对电极,组成三电极体系,以步骤A1中的含K2S2O8的PBS缓冲溶液为电解液,在 ‑1.7~0 V的电化学窗口范围内,光电倍增管高压800 V,扫速0.1 V/s,进行循环伏安扫描,记录发光强度‑时间曲线,建立电化学发光适配体传感器结合莱克多巴胺前后的发光强度差值与莱克多巴胺标准溶液中的莱克多巴胺浓度对数值的线性关系,得到相应的线性回归方程;

A4.样品中莱克多巴胺的检测:所述样品先经过预处理再用步骤A1中的含K2S2O8的PBS缓冲溶液调节pH,然后放入电化学发光适配体传感器浸泡相同时间,使电化学发光适配体传感器结合莱克多巴胺,然后取出并淋洗,作为工作电极,再采用步骤A3方法检测发光强度,再根据线性回归方程计算出样品中莱克多巴胺的浓度。