利索能及
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专利号: 2020100081983
申请人: 济南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-12-01
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.多肽在制备抑制病毒性出血败血症病毒基因组RNA复制的药物中的应用;所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;

所述多肽通过与病毒基因组RNA竞争NP上的结合位点来抑制病毒基因组RNA的复制。

2. 一种合成结合SEQ ID NO.1所示多肽的NP蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将SEQ ID NO.2所述的多核苷酸与NP基因通过SEQ ID NO.4‑SEQ ID NO.7所示的PCR引物自退火连接,并进一步PCR扩增,回收PCR产物;

(2)将步骤(1)回收的PCR产物连接到质粒载体上,得到重组质粒;然后将重组质粒转入大肠杆菌,得到阳性重组菌株;

(3)将阳性重组菌株振摇培养1‑2 h,然后加入IPTG,使IPTG的终浓度为0.5 M,诱导培养16‑18 h;将诱导培养后的菌体离心,沉淀用收菌buffer悬起,用高压匀质机破菌,破菌后进行离心,将离心分离后的上清与镍介质在4 ℃条件下进行孵育,然后依次进行洗杂、洗脱目的蛋白、浓缩和纯化处理,得到结合上述多肽的NP蛋白。