1.一种甘蔗尾叶青贮用复合菌剂,其特征在于:它的活性成分包括矮小假丝酵母菌(Candida humils)GS2、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)GS3、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)GS4、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GS5;
所述矮小假丝酵母菌(Candida humils)GS2于2018年7月02日保藏在中国,武汉,武汉大学,中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M 2018441;
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)GS3于2018年08月03日保藏在中国,武汉,武汉大学,中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M 2018522;
干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)GS4于2018年08月03日保藏在中国,武汉,武汉大学,中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M 2018523;
副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GS5于2018年08月03日保藏在中国,武汉,武汉大学,中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M 2018524;
所述矮小假丝酵母菌(Candida humils)GS2、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)GS3、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)GS4、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GS5以活菌数百分比计,比例为20%:60%:10%:10%。
2.根据权利要求1所述的一种甘蔗尾叶青贮用复合菌剂的制备方法,其特征在于:具体包括以下步骤:
(1)、活化:提取4种菌种分别按照菌种10%添加量分别接入液体培养基,矮小假丝酵母菌(Candida humils)GS2培养温度为28 ℃24h,150r/min摇床培养;植物乳杆菌(Lactobacillus plantarumGS3)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)GS4、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GS5温度为37℃24h,静态培养;
(2)、扩大培养:接着将活化后的4种菌株按照5%添加量分别接入液体培养基,矮小假丝酵母菌(Candida humils)GS2培养温度为28 ℃24h,150r/min摇床培养;植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)GS3、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)GS4、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GS5培养温度为37℃24h,静态培养,用涂板对接种菌液进行计数;
(3)、冷冻干燥:用95%乙醇擦拭离心机内壁做杀菌处理,用灭菌离心管将浓缩培养的菌发酵液按照4种菌株的浓度比例混合后,于3000r/min 下离心20min时间,弃上清液得菌泥,用适量的无菌水同菌泥充分混匀,制得浓度均匀的菌悬液,添加保护剂,菌泥:保护剂=1:3,一起转入无菌培养皿,厚度为皿高的一半,用保鲜膜包裹,置于超低温冰箱中预冻5h,形成小的冰晶,立即转入冷冻干燥装置中干燥,直到没有明水为止,取样测定此时活菌数,立即真空密封包装后于4℃冰箱保藏。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于:所述保护剂按照百分数计,由以下组分组成80%无脂奶粉、8% 海藻糖、8% 谷氨酸钠、4%甘油。
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于:在步骤(1)‑(2)中,MRS液体培养基用于植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)GS3、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)GS4、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GS5活化和菌液培养;MRS固体培养基用于植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)GS3、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)GS4、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)GS5涂板计数;YPD液体培养基用于矮小假丝酵母菌(Candida humils)GS2活化和菌液培养;YPD琼脂用于矮小假丝酵母菌(Candida humils)GS2涂板计数。
5.根据权利要求1‑4任意一项所述的一种甘蔗尾叶青贮用复合菌剂在制备青贮甘蔗尾叶中的应用。
6.根据权利要求1所述的一种甘蔗尾叶青贮用复合菌的使用方法,其特征在于:包括下列步骤:将新鲜甘蔗尾叶切碎至2‑3cm,使用甘蔗尾叶青贮用复合菌剂洒在新鲜甘蔗尾叶上混均装入青贮包抽真空,发酵共60天,即可。