1.一种肿瘤干细胞三维培养方法,其特征在于:
(1)以丙烯酸树脂为原料,用LCD光固化3D打印机打印蜂巢状培养支架,所述蜂巢状培养支架由蜂巢小室培养架和固定支架两部分组成;
(2)将聚己内酯加入三氯甲烷与甲醇体积比为6~8:1的混合液中,常温下搅拌10~
12h,然后加入JK1,继续搅拌10~12h,再加入丝心蛋白,搅拌均匀,得到纺丝液;所述纺丝液中聚己内酯的浓度为0.1~0.3g/mL,聚己内酯与JK1、丝心蛋白的质量比为1:0.01~0.2:
0.1~0.3,JK1的结构式如下所示:
(3)采用步骤(2)的纺丝液,在步骤(1)的蜂巢小室培养架底部纺丝形成聚己内酯/JK1复合纤维膜;
(4)采用逐层自组装技术,用生长因子修饰步骤(3)的聚己内酯/JK1复合纤维膜;
(5)将步骤(4)修饰后的蜂巢小室培养架用固定支架固定后放置于培养皿内,将收集好的肿瘤细胞用无血清培养基重悬后加入培养皿并轻轻晃动,使细胞沉入蜂巢小室中,常规培养。
2.根据权利要求1所述的肿瘤干细胞三维培养方法,其特征在于:步骤(1)中,所述蜂巢小室培养架为圆形,蜂巢小室的高度为0.2~1mm,蜂巢小室边长为0.1~0.5mm。
3.根据权利要求1所述的肿瘤干细胞三维培养方法,其特征在于:步骤(2)中,所述纺丝液中聚己内酯的浓度为0.15~0.2g/mL,聚己内酯与JK1、丝心蛋白的质量比为1:0.05~
0.1:0.1~0.3。
4.根据权利要求1所述的肿瘤干细胞三维培养方法,其特征在于:步骤(3)中,所述聚己内酯/JK1复合纤维膜的纤维直径为0.5~1.5μm。
5.根据权利要求1所述的肿瘤干细胞三维培养方法,其特征在于:步骤(4)中,所述生长因子为白血病抑制因子、血小板源性生长因子、胰岛素样生长因子、重组人表皮生长因子、重组人碱性成纤维中任意两种。
6.根据权利要求5所述的肿瘤干细胞三维培养方法,其特征在于:所述生长因子为重组人表皮生长因子和重组人碱性成纤维。