利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2019111220506
申请人: 淮阴师范学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种阴沟肠杆菌HYN-P47,其特征在于:2019年4月10日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:M 2019247。

2.一种生物助悬剂,其特征在于:所述生物助悬剂是通过权利要求1所述的阴沟肠杆菌对原料发酵后加工制备的,所述原料分为A组和B组,A组为葡萄糖、酵母膏、牛肉膏;B组为葡萄糖,硫酸铵,磷酸氢二钾,磷酸二氢钾,氯化钠,酵母膏。

3.如权利要求2所述的一种生物助悬剂,其特征在于:所述A组原料的质量体积比(g/ml)分别为葡萄糖1-5%,酵母膏0.1-0.5%和牛肉膏0.2-1%;所述B组原料的质量体积比(g/ml)分别为葡萄糖 2-4%,硫酸铵0.1-0.5%,磷酸氢二钾0.3-0.8%,磷酸二氢钾 0.1-0.5%,氯化钠0.1%,酵母膏0.5-1%。

4.如权利要求2-3任一项所述的一种生物助悬剂,其特征在于:所述A组原料的pH值为

7.0。

5.一种生物助悬剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1.用接种环从斜面挑取阴沟肠杆菌HYN-P47菌种接种于三角摇瓶中,三角瓶中培养基由A组原料制成,振荡培养;

S2.将步骤S1培养好的菌种接入种子罐,种子罐中培养基由B组原料制成,培养至对数生长期得种子液;

S3.将S2种子液接入发酵罐,发酵罐中培养基由B组原料制成,发酵结束后得到含生物助悬剂的发酵液;

S4.将S3制得的发酵液于离心机上离心10 20 min,收集上清液;

~

S5.将S4收集的上清液用超滤膜进行一次浓缩得一次浓缩液,一次浓缩液再在60 70℃~真空中进行二次浓缩得二次浓缩液;

S6.向S5的二次浓缩液中加入3 5倍体积无水乙醇,4℃沉淀12小时后离心,收集沉淀物~干燥后得生物助悬剂。

6.如权利要求5所述的一种生物助悬剂的制备方法,其特征在于:所述S2中菌种的接入量按体积比占比为1-5%,即菌种量体积与接种后培养液的体积比, V菌种/(V菌种+V种子培养基);所述S3中种子液接入量按体积比占比为1-10%,即种子液体积与接种后发酵液的体积比,V种子液/ V种子液+V发酵培养基。

7.如权利要求5所述的一种生物助悬剂的制备方法,其特征在于:所述S2种子罐培养条件:通风量为1 2VVM,搅拌速度为150 200r/min,培养温度为32℃,培养时间为36 48h。

~ ~ ~

8.如权利要求5所述的一种生物助悬剂的制备方法,其特征在于:所述S3发酵罐发酵条件:通风量为0.8 1.2VVM,搅拌速度为120 180r/min,培养温度为32℃,培养时间为3天。

~ ~

9.如权利要求5所述的一种生物助悬剂的制备方法,其特征在于:所述S5中超滤膜的截留分子量为1万。

10.如权利要求5所述的一种生物助悬剂的制备方法,其特征在于:所述S5一次浓缩液的体积为所用上清液体积的1/3,二次浓缩液体积为所用上清液体积的1/10。