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专利号: 2019109708776
申请人: 江苏科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种40 ℃下高比活木聚糖酶突变体,其特征在于,以木聚糖酶野生型XYL10C‑∆N的序列SEQ ID NO.11为基础,选择突变位点R进行突变得木聚糖酶突变体:当突变位点R为M137E时,木聚糖酶突变体为XYL∆N‑M137E,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;

当突变位点R为MF137/138DA时,木聚糖酶突变体为XYL∆N‑MF137/138DA,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;

当突变位点R为MF137/138DS时,木聚糖酶突变体为XYL∆N‑MF137/138DS,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;

当突变位点R为MF137/138QP时木聚糖酶突变体为XYL∆N‑MF137/138QP,其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;

当突变位点为RMF137/138SL时,木聚糖酶突变体为XYL∆N‑MF137/138SL,其核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。

2.根据权利要求1所述的40 ℃下高比活木聚糖酶突变体,其特征在于,编码木聚糖酶突变体XYL∆N‑M137E的氨基酸序列如SEQ ID NO.6;编码木聚糖酶突变体XYL∆N‑MF137/

138DA的氨基酸序列如SEQ ID NO.7;编码木聚糖酶突变体XYL∆N‑MF137/138DS的氨基酸序列如SEQ ID NO.8;编码木聚糖酶突变体XYL∆N‑MF137/138QP的氨基酸序列如SEQ ID NO.9;编码木聚糖酶突变体XYL∆N‑MF137/138SL的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示。

3.一种重组载体,含有核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示的重组表达载体。

4.一种重组菌株,含有表核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示的表达载体的重组菌株。

5.权利要求1所述的40 ℃下高比活木聚糖酶突变体的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:1) 采用over‑lap PCR的方法扩增高催化效率木聚糖酶突变体序列片段;2) 将木聚糖酶突变体序列片段克隆到表达载体pPIC9r的EcoR I和Not I限制性酶切位点之间,得重组载体;3) 将突变体重组载体转化毕赤酵母GS115,诱导表达,获得突变株;4)培养重组菌株,诱导重组木聚糖酶表达;5)回收并纯化所表达的高比活木聚糖酶突变体。

6.权利要求1所述的40 ℃下高比活木聚糖突变体、权利要求3所述的重组载体或权利要求4所述的重组菌株在用作饲料添加剂或降解木质纤维素上的应用。