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专利号: 2019106787831
申请人: 山东省农业科学院农业资源与环境研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-26
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一株侧孢芽孢杆菌(Baclilus laterosporus)Zhscb-kxn,2019年3月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号CGMCC No.17377。

2.权利要求1所述侧孢芽孢杆菌(Baclilus laterosporus)Zhscb-kxn的培养方法,步骤如下:(i)将侧孢芽孢杆菌(Baclilus laterosporus)Zhscb-kxn接种于活化培养基中,在35~37℃条件下,活化培养22~26h,制得活化菌株;

(ii)将步骤(i)制得的活化菌株接种于扩大培养基中,在35~37℃、转速为200~240r/min条件下,扩大培养3~4d,制得种子液;

(iii)将步骤(ii)制得的种子液按体积百分比5%~8%的比例转接至固体发酵培养基中,在35~37℃条件下,发酵培养3~4d,制得侧孢芽孢杆菌(Baclilus laterosporus)Zhscb-kxn固体培养料。

3.如权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述步骤(i)中,活化培养基每升组份如下:蛋白胨5~8g,酵母浸膏2~3g,玉米粉8~10g,氯化钠2~3g,葡萄糖3~5g,琼脂15~

20g,水定容至1L,pH7~7.5。使用时121℃0.13Mpa灭菌40min。

4.如权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述步骤(ii)中,扩大培养基每升组份如下:葡萄糖18~22g、豆饼粉9~11g、玉米浆4.5~5.5g,水定容至1L,pH6.8~7.2。使用时

121℃0.13Mpa高压灭菌40min。

5.如权利要求2所述的培养方法,其特征在于,所述步骤(iii)中,固体培养基组份如下,均为重量份:

30~35份麸皮,15~18份花生壳粉,13~15份干燥甘蔗渣,2~3份草木灰,0.2份氯化铵,0.01份纤维素酶,含水量为40~45%为宜,pH自然。使用时堆置发酵腐熟2~3d。

6.一种抗病耐盐碱功能微生物菌剂,含有有效微生物的活菌菌体浓度如下:侧孢芽孢杆菌(Baclilus laterosporus)Zhscb-kxn(1~3)×1010cfu/g、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilus)(3~6)×109cfu/g。

7.权利要求6所述抗病耐盐碱功能微生物制剂的制备方法,包括如下步骤:(1)将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilus)进行活化培养、扩大培养、发酵培养,制得枯草芽孢杆菌菌液;

(2)将上述侧孢芽孢杆菌(Baclilus laterosporus)Zhscb-kxn菌液与步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌菌液按体积比(3~5):1的比例混合后,接种于固态发酵培养基中,在温度332

℃~37℃、通气量0.5~1.5m/h的条件下,发酵培养3~4d,制得固态发酵菌剂;

(3)将步骤(2)制得的固态发酵菌剂经干燥、粉碎,制得抗病耐盐碱功能微生物制剂。

8.如权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的活化,温度35℃~37℃,活化时间24h,活化培养基每升组份如下:蛋白胨5~8g,酵母浸膏2~3g,玉米粉8~10g,氯化钠2~3g,葡萄糖3~5g,琼脂15~

20g,水1L,pH7~7.5;

优选的,所述步骤(1)中扩大培养,温度35℃~37℃、转速220r/min条件下,培养时间3~4d,扩大培养基每升组份如下:葡萄糖20g、豆饼粉10g、玉米浆5g,水1L,pH6.8~7.2;

优选的,所述步骤(2)中,固态发酵培养基组份如下,均为重量份:

30~35份麸皮,15~18份花生壳粉,13~15份干燥甘蔗渣,2~3份草木灰,0.2份氯化铵,0.01份纤维素酶,含水量40%~45wt%,pH自然;

优选的,所述步骤(2)中,接种量为固态发酵培养基质量的5~10%;

优选的,所述步骤(3)的干燥条件为:温度45~50℃,通气量1.8~3m2/h,干燥至水分含量小于等于15%。

9.权利要求6所述抗病耐盐碱功能微生物制剂在盐碱地种植玉米中的应用。

10.如权利要求9所述的应用,其特征在于,抗病耐盐碱功能微生物菌剂的施用量为每亩地1~2kg,施用于作物根际区域,田间持水量在30~40%。