1.一种金银花体内代谢产物的识别方法,其特征在于:包括如下步骤:制备金银花醇提物,给实验组动物连续灌胃几天,对照组灌胃等量的生理盐水;
灌胃后禁食8小时,取血样,通过超高效液相色谱‑高分辨质谱分析血样,得到包含质量数、保留时间和峰强度的峰值表;
其中,液相色谱‑质谱分析中,液相色谱的色谱条件为:色谱柱为超高效液相色谱柱Waters HSS T3 column,2.1×100mm,1.8μm;
正离子模式:流动相A和B分别为含有0.1%甲酸的水溶液和含有0.1%甲酸的乙腈溶液;进样量5μL,流速0.3mL/min,洗脱梯度为0‑1min,5%B;1‑6min,5‑40%B;6‑8min,40‑
60%B;8‑15min,60‑85%B,15‑18min,85‑100%B;18‑23min,100%B;23‑23.1min,100‑5%B;23.1‑28min,5%B,柱温45℃;
负离子模式下,流动相C为含有6.5mM碳酸氢铵的水溶液,流动相D为甲醇/水溶液,95:
5,v/v,进样量5μL,流速0.35ml/min,洗脱梯度为1‑3min,2‑40%D;3‑5min,40‑65%D;5‑
8min,65‑92%D;8‑12min,92%D;12‑13min,100%D;18‑18.1min,100‑2%D;18.1‑23min,
2%D,柱温50℃;
对实验组和对照组进行金银花和灌胃时间的双因素方差分析,筛选出只受金银花影响的变量,从只受金银花影响的变量中筛选出可能的金银花代谢产物;
对可能的金银花代谢产物进行二级质谱分析,通过二级质谱中性丢失80确定为硫酸化代谢产物,中性丢失176确定为葡萄糖醛酸化代谢产物;二级质谱中同时出现中性丢失80和中性丢失176为葡萄糖醛酸苷的硫酸化代谢产物;
其中所述硫酸化代谢产物为:二氢香豆酸‑硫酸盐、二氢咖啡酸‑硫酸盐、二氢阿魏酸‑硫酸盐、邻苯二酚‑硫酸盐;
所述葡萄糖醛酸化代谢产物为:芹菜素‑葡萄糖醛酸苷、芹菜素‑甲基醚‑葡萄糖醛酸苷和5‑羟基‑6‑甲氧基吲哚‑葡萄糖醛酸苷;
所述葡萄糖醛酸苷‑硫酸化代谢产物为:芹菜素‑葡萄糖醛酸苷‑硫酸盐和异鼠李素‑葡萄糖醛酸苷‑硫酸盐。
2.根据权利要求1所述的识别方法,其特征在于:所述金银花醇取物为金银花的甲醇/水提取液或乙醇/水提取液,醇与水的体积比为1:0.8‑1.2,金银花与醇/水提取液的质量比为3:900‑1100。
3.根据权利要求1所述的识别方法,其特征在于:所述血样为血清或血浆。
4.根据权利要求3所述的识别方法,其特征在于:所述血样采用提取试剂进行提取,得上清液,冻干、复溶,然后采用复溶试剂进行复溶,复溶后进行液相色谱‑质谱分析,所述提取试剂为乙腈或甲醇。
5.根据权利要求4所述的识别方法,其特征在于:所述复溶试剂为乙腈/水溶液或甲醇/水溶液,其中水的体积分数为50%‑95%。
6.根据权利要求1所述的识别方法,其特征在于:连续灌胃的时间为3‑7天。
7.根据权利要求1所述的识别方法,其特征在于:质谱条件为:喷雾器,2.0Bar;干燥气,
8L/min;干燥气温度,200℃;离子漏斗,300Vpp;六级杆,60Vpp;传输时间,80μs;毛细管电压正模式下设置为3500V,负模式下设置为3000V;质量数扫描范围为5‑1200,二级质谱碰撞能设定为20eV‑50eV。
8.根据权利要求1所述的识别方法,其特征在于:在筛选金银花代谢产物时,根据空白背景将噪声设置为1000,信噪比设置为50。